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1、中科院动物所和大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（ ）A、克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有细胞核移植、动物细胞融合、早期胚胎体外培养 B、上述事例说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达 C、在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化 D、若选用胚胎细胞核移植，成功率将明显高于体细胞核移植
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2、“试管牛”是从优质供体母牛体内采集卵母细胞，经体外培养成熟后，加入优质种公牛精液进行体外受精，所获得的受精卵经体外培养后，再将早期胚胎移植到受体牛体内，即“借腹怀胎”。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A、①体外受精时，经过获能处理的精子才可与培养成熟的卵细胞完成受精作用 B、②胚胎移植应取发育到囊胚或囊胚期以前的胚胎 C、受体母牛和供体母牛可以是不同的品种 D、运用胚胎分割技术获得的多个胚胎，发育成的个体性状完全相同 -
3、下列关于对小牛组织进行动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）A、需要选用幼龄动物的组织是因为其全能性高 B、为防止污染，培养基中需加入高浓度的抗生素 C、应在无菌、无毒，温度、pH和渗透压适宜的环境中培养 D、体外培养时，所有动物细胞必须贴附在某一固相支持物上生长
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4、胚胎工程具有广阔的应用前景，如可用于繁殖高产奶牛。下列叙述正确的是（ ）A、可对优质母牛饲喂促性腺激素，使其排出更多卵细胞 B、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 C、胚胎分割只能对桑葚胚进行操作，囊胚阶段无法分割 D、一般取囊胚内细胞团细胞进行性别鉴定以获得雄性奶牛
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5、研究发现雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（ ）
A、经射线处理①后可能获得雪莲次生代谢产物高产的细胞 B、图中培养单细胞或小细胞团所用的培养基为液体培养基 C、可将培养的细胞置于低渗溶液中涨破以便提取次生代谢物 D、利用该技术生产的雪莲次生代谢物不受季节和气候的影响 -
6、非对称细胞融合是指融合前分别用射线破坏某原生质体的细胞核和用碘乙酰胺破坏另一原生质体的细胞质，实现细胞质基因和细胞核基因的优化组合。已知甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙植物细胞进行非对称细胞融合相关研究，以期获得高产耐盐碱再生植株。下列说法错误的是（ ）A、原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证 B、在用酶解法降解细胞壁之前，先用较高渗透压溶液处理细胞 C、用碘乙酰胺处理甲植物原生质体，用射线照射乙植物原生质体 D、原生质体需在等渗溶液中保存，以防止过度失水或吸水而死亡
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7、下列有关植物细胞工程应用的叙述，正确的是（ ）A、利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体 B、取马铃薯的顶端分生区细胞进行组织培养，可获得抗病毒的脱毒苗 C、通过细胞产物的工厂化生产获得紫杉醇时，需要把外植体培养成完整的紫杉醇植株幼苗 D、由愈伤组织培养到幼苗的过程需要光照，以诱导叶绿素的形成
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8、植物组织培养技术可实现优良品种的快速繁殖，下列相关叙述错误的是（ ）A、外植体需经过严格的消毒处理后才能用于接种 B、脱分化过程需要适宜的植物激素配比诱导 C、外植体直接再分化就能形成完整的植株，无需脱分化 D、再分化是愈伤组织重新分化形成根、芽等器官的过程
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9、下列关于细胞全能性的叙述，正确的是（ ）A、种子发育成为完整植株，不能体现植物细胞的全能性 B、只有植物的生殖细胞才具有发育成完整植株的潜能 C、愈伤组织是高度分化的细胞，丧失了全能性 D、植物体细胞杂交获得的杂种植株不具有全能性
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10、苹果营养丰富，其深加工产品苹果酒和苹果醋具有独特风味，生产流程包括酒精发酵和醋酸发酵。下列叙述正确的是（ ）A、酒精发酵的终产物均可直接被醋酸菌利用 B、酒精发酵需定期排气，醋酸发酵需持续通气 C、酒精发酵完成后需要升高温度杀死酵母菌从而进行醋酸发酵 D、利用酒精进行醋酸发酵，发酵液面会出现气泡
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11、某除草剂不易被降解，长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员如图程序选育能降解该除草剂的细菌，已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是（ ）
A、操作I中接种环在酒精灯灼烧后无需冷却 B、操作I的接种方法可用于细菌计数 C、药品称量、溶化和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行 D、分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养 -
12、下列关于实验操作中消毒灭菌说法错误的是（ ）A、对实验需要的实验材料、器具和培养基均采用高压蒸汽灭菌 B、划线分离需对接种环进行多次灼烧灭菌，各次灭菌目的并不完全相同 C、实验结束后，将实验产生的废弃物进行灭菌处理 D、灭菌较消毒更为彻底，可杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物
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13、为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对甘蓝型油菜油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(Luc)构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列如图所示。箭头表示转录方向。
(1)、利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物上添加的限制酶是。(2)、常用农杆菌转化法将目的基因导入油菜受体细胞，目的基因将插入Ti质粒的上，并最终将其整合到染色体DNA上，从而使其得以维持稳定和表达。(3)、乙酰—CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因(ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞，通过技术获得转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。正常植株
转基因A植株
转基因B植株
AC酶
ATGL酶
①在分子水平上，用方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述表格结果。
②基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在甘蓝型油菜油脂积累中的调控机制是。
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14、胡萝卜素是一种抗氧化剂和维生素A前体。科研人员将crtE、crtB、crtI三个关键酶基因导入大肠杆菌，使其能利用内源前体法尼基焦磷酸(FPP)合成胡萝卜素。构建的表达载体如下图，三个目的基因以多顺反子结构(共用一个启动子，各自带有核糖体结合位点RBS)插入多克隆位点(MCS)。转化宿主为大肠杆菌，在含氨苄青霉素和X-gal的平板上筛选，挑取白色菌落验证后，再转入表达菌株诱导表达。
注：lacZ基因编码产生的半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题：
(1)、在含氨苄青霉素和X-gal的平板上，白色菌落代表大肠杆菌导入质粒，蓝色菌落代表大肠杆菌导入质粒。在构建基因表达载体时，除需要限制酶外，还需要酶。(2)、该载体采用多顺反子结构，三个基因共用一个启动子的作用是。(任写一点即可)(3)、实验测得重组菌的胡萝卜素产量较低。科研人员推测可能是由于FPP供应不足。请提出一种基因工程层面的改进策略(不改变培养基成分)，。(4)、若最终检测发现重组菌的胡萝卜素产量几乎为零，但菌落能在含氨苄青霉素的平板上正常生长，且菌落为白色。分析可能的原因(写出两点)。 -
15、水螅具备很强的再生能力，其大部分身体结构被破坏都能够复原，理论上可以无限再生，近乎永生。研究表明，水螅的再生能力依赖体内的Wnt基因。为了研究Wnt基因的作用机理和对小鼠成纤维细胞再生是否有促进作用，科学家利用基因工程和细胞工程技术做了以下实验。回答下列问题：(1)、获取Wnt基因的途径之一是：提取了水螅细胞全部DNA后，采用PCR技术扩增Wnt基因，该技术的原理是。已知Wnt基因一条链两端的序列为5’-AATTGCGG-Wnt基因-TCGAAACT-3’，根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是(填字母)。
A．引物I是5’-AATTGCGG-3’，引物Ⅱ是5’-TCGAAACT-3’
B．引物I是5’-AATTGCGG-3’，引物Ⅱ是5’-AGTTTCGA-3’
C．引物I是5’-CCGCAATT-3’，引物Ⅱ是5’-TCGAAACT-3’
D．引物I是5’-CCGCAATT-3’，引物Ⅱ是5’-AGTTTCGA-3’
(2)、如图甲为获取的含有Wnt基因的DNA片段，为保证目的基因和质粒丙正确连接，在该实验中，切割含有目的基因DNA片段使用的限制酶为 ， 原因是。
(3)、若要验证Wnt基因在小鼠成纤维细胞再生中是否起到促进作用，可以将对小鼠成纤维细胞进行体外培养，需先用处理使组织分散成单个细胞。实验组小鼠细胞注入含有Wnt基因的重组载体，对照组注入不含Wnt基因的空载体，实验结果显示实验组小鼠细胞增殖和再生能力显著高于对照组，说明。 -
16、如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；请据图回答下面的问题。
(1)、图1中注射到小鼠体内的物质是。与植物原生质体融合相比，细胞A的形成过程中特有的诱导融合方法是。(2)、科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂。据此，为获得既能产生抗体又能无限增殖的细胞，请简要写出一种新思路。(3)、图2优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是。(4)、若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2所示囊胚阶段的胚胎进行 ， 操作过程需要特别注意的问题是 ， 否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 -
17、紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病；百脉根富含单宁，饲喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓胀病的新型苜蓿。(注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能)
(1)、据图可知，本研究主要利用的两个生物技术的原理分别是、。(2)、①过程的发生，必须进行人工诱导，人工诱导原生质体融合的化学法除聚乙二醇融合法外，还有法等。其中只有异源融合体才能存活和具有再生能力，请推测原因是。(3)、百脉根富含单宁，单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品，若要通过技术生产单宁，需将百脉根细胞培养到阶段，再筛选出稳定高产单宁的细胞进行培养。 -
18、某科研小组研究了苋菜叶绿体基因pbsA编码的D1蛋白在特定位点发生突变，可获得对除草剂的抗性，野生型品系和突变品系的部分DNA碱基序列和氨基酸位置，结果如表所示。下列叙述正确的是（ ）
野生型品系
CGA丙氨酸
AGT丝氨酸
AAG苯丙氨酸
TTA天冬氨酸
突变品系
CGT丙氨酸
GGT脯氨酸
AAG苯丙氨酸
TTA天冬氨酸
氨基酸位置
227
228
229
230
A、叶绿体基因主要随卵细胞传递，该抗除草剂性状不易通过花粉造成基因污染 B、碱基编辑仅改变pbsA基因的碱基排列顺序，不改变基因数量，不属于基因突变 C、若编辑后基因转录产物不变，仅翻译产物改变，说明编辑发生在内含子区段 D、若将该抗除草剂基因通过农杆菌转化法整合到苋菜核基因组，其遗传仍不遵循孟德尔定律 -
19、科研人员利用农杆菌转化法将含有目的基因(GUS基因，长度500 bp)的Ti质粒导入拟南芥，经筛选获得若干候选转基因植株。提取各植株的基因组DNA，利用目的基因特异性引物进行PCR扩增，并通过琼脂糖凝胶电泳检测产物。电泳结果如下图所示(M为DNA分子标准参照物，泳道1~4为待测植株样品)，下列叙述正确的是（ ）
A、泳道1对应的植株一定是纯合的转基因植株 B、泳道2对应的植株未成功转化，应直接丢弃 C、泳道3对应的植株中出现非特异性扩增片段的原因可能是引物与非目的序列有同源性 D、泳道4对应的植株中目的基因的表达量较低 -
20、噬菌体展示技术是将编码噬菌体表面蛋白的基因与外源肽段基因融合，使外源蛋白/肽段展示在噬菌体表面的筛选技术。下图是利用该技术制备人丙型肝炎病毒(HCV)单克隆抗体的流程。下列有关叙述正确的是（ ）
注：抗体重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因连接获得单链抗体(scFv)基因
A、逆转录合成cDNA的过程，需要加入总RNA、逆转录酶和四种游离的核糖核苷酸 B、重组噬菌体侵染大肠杆菌时，应该使用处理使大肠杆菌处于吸收DNA分子的状态 C、专一抗体检验利用的原理是抗原和抗体的特异性结合 D、该技术产生的单克隆抗体可以直接用于人体疾病治疗，没有免疫排斥风险