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1、重组人胰岛素是首个通过基因工程实现产业化的医用蛋白，科研人员以人胰岛素基因为目的基因，利用大肠杆菌BL21（DE3）菌株构建工程菌生产重组胰岛素，其部分过程如下图。回答下列问题：
限制酶
酶切序列5'→3'
BamHⅠ
G↓GATCC
BglⅡ
A↓GATCT
NheⅠ
G↓CTAGC
SmaⅠ
CCC↓GGG
XmaⅠ
C↓CCGGG
(1)、图中过程①中需要从细胞中提取RNA，得到的人胰岛素基因中（填“含有”或“不含有”）启动子；过程②需要的酶有。(2)、已知胰岛素基因的A链为编码链，其部分碱基序列为5'-CAGCTT……AAGATCTT……TACGCT-3'。为了使目的基因与载体正确连接，应该选择限制酶切割质粒，扩增目的基因时的PCR引物是。A.5'-GGCCCGGGCAGCTT-3' B.5'-GGAGATCT CAGCTT-3'
C.5'-GGGGATCCCAGCTT-3' D.5'-GGGCTAGCAGCGTA-3'
(3)、将质粒导入大肠杆菌后，还需要进行筛选。需要先将大肠杆菌置于含的A培养基中培养，再从A培养基中选取菌落接种于含的B培养基，能够的菌落即为成功导入胰岛素基因的大肠杆菌。(4)、为鉴定导入的人胰岛素基因是否成功表达，可以用技术进行检测。 -
2、某人工鱼塘生态系统需要人类定期投放饲料，研究人员对该生态系统的能量流动和鲤鱼种群数量进行调查研究。回答下列问题：(1)、下表为该人工鱼塘生态系统部分营养级的能量流动数据（单位：kJ·m-2·a-1）：
营养级
同化能
呼吸散失
流向分解者
未利用
饲料输入
第一营养级
X
25000
8000
12000
0
第二营养级
Y
3000
1000
1800
1500
第三营养级
1200
500
200
300
0
①流经该生态系统的总能量是kJ·m-2·a-1）。
②第一营养级到第二营养级的能量传递效率为（取小数点后一位小数）。
(2)、第一次捕获并标记鲤鱼100只后放回。标记至重捕期间，鲤鱼大量繁殖，种群数量增加，且标记个体无死亡、无迁出。一段时间后重捕80只，其中有标记的10只，由于操作不当，计数时重捕个体中标记的个体死亡2只。①该鲤鱼种群数量约为只。
②与重捕时的实际种群数量相比，估算值（填“偏大”“偏小”或“基本相同”）。
(3)、该鱼塘采用立体养殖模式，根据淡水鱼在自然环境中的混合生长状态，实行以四大家鱼为主的多鱼种混养模式，主要体现了群落的结构。(4)、该鱼塘采用了“陆基种桑、桑叶饲蚕、蚕沙喂鱼、塘泥培桑”的循环模式，其生态学意义是。 -
3、下图为人类记忆过程的四个阶段及其联系示意图。
材料1：我国科学家研究发现，脑血管内皮细胞PTEN基因敲除导致小鼠海马区成体神经干细胞过度增殖和分化障碍，小鼠依赖性学习和记忆能力显著下降，并伴随脑中乳酸浓度显著增加。进一步研究证实，对小鼠海马区注射乳酸可以模拟PTEN基因敲除小鼠的表型，使小鼠海马区成体神经干细胞发生异常。
材料2：科学家们发现，乙酸能像开了“外挂”一样显著增强雌性小鼠的长期记忆。这种“外挂”仅在特定学习情境下被激活，且能精准作用于雌性小鼠大脑的海马体，通过一系列复杂的表观遗传修饰和基因表达改变，使小鼠获得由乙酸驱动的、情境依赖式的超强记忆能力。
请结合所学知识，回答下列问题：
(1)、学习和记忆是神经系统不断接受刺激，获得新的行为、习惯和积累经验的过程，其形成与大脑皮层的海马体密切相关，其中长期记忆的形成可能与突触形态及功能的改变以及有关，这两种变化的本质是通过改变神经元之间的（填“物质运输”“信号传递效率”或“基因数量”）来增强记忆。(2)、结合上图和材料1分析：阿尔茨海默病（AD）患者常表现为近期（几天前甚至几周前）记忆受损、远期记忆保留，推测AD患者脑中乳酸浓度可能；脑血管内皮细胞的PTEN基因表达水平可能；受损的记忆环节最可能是上述三级记忆模型中的。(3)、材料2中“乙酸能精准作用于雌性小鼠大脑的海马体，引发表观遗传修饰和基因表达改变”，若要验证乙酸增强记忆的作用具有性别特异性，需设计组实验，分别是 ， 预期实验结果为。(4)、如果将该记忆机制应用于农业生产中的害虫防治，干扰害虫的记忆形成，可以降低其对农作物的危害，这是对生态系统的功能的应用。 -
4、水稻抗寒性状由抗寒关键基因ACT1的DNA甲基化表观修饰调控，且与核基因R/r协同作用：①ACT1基因表达的产物为抗寒蛋白，其启动子区域的甲基化修饰可被低温特异性去除，常温下该区域保持高甲基化状态；②核基因R（显性）表达的蛋白可增强ACT1的转录效率，r基因无此功能；ACT1表观修饰位点与R/r基因独立遗传，低温下只有含R基因（R_）且ACT1高效表达时，水稻抗寒能力强，其余情况为抗寒弱。(1)、ACT1基因启动子的DNA甲基化修饰（填“属于”或“不属于”）可遗传变异；常温下该甲基化修饰使ACT1基因表达受到抑制，该过程主要阻碍了基因表达的阶段。(2)、将常温下培育的基因型为Rr（ACT1高甲基化）的抗寒弱水稻自交，所得F1全部在低温环境下种植，回答下列问题：
①F1中抗寒强水稻所占的比例为。
②从F1中随机选取一株抗寒强水稻自交，所得F2在低温下种植，F2中抗寒弱水稻的比例为。
(3)、结合表观修饰与核基因的协同作用，完善水稻抗寒的完整分子机制：。(4)、欲验证“R蛋白可增强ACT1的转录效率”，请完善核心实验设计思路：对实验组与对照组进行RNA提取、、依据设计引物进行PCR、电泳并比较实验组与对照组差异。 -
5、在盐碱地农业生产中，作物遭受盐胁迫会导致光合效率降低、活性氧（ROS）过量积累，进而抑制生长。为开发安全、高效的作物抗逆技术，科研人员对纳米材料——碳点展开研究。碳点是一类粒径微小、以碳为主要组成、可生物降解且具有荧光特性的新型纳米材料。回答下列问题：(1)、与铜、银等传统金属纳米材料相比，碳点在农业应用中更具优势。从环境保护和人体健康两个角度，简述碳点作为抗逆材料的优点：。(2)、碳点受紫外线激发可发出蓝光和红光，与叶绿体中（填色素名称）的吸收光谱匹配，从而提高光能捕获效率。施用碳点后，短时间内叶肉细胞叶绿体基质中C3含量会（填“升高”“降低”或“基本不变”），原因是。(3)、科研人员在盐胁迫条件下进行实验，结果如图所示，根据图中数据结果可得出的结论是。
(4)、研究表明，在实验过程中，作物受盐胁迫时碳点可富集在液泡中，结合上述材料，从液泡的功能方面，分析可能的原因：。 -
6、水稻中甲和乙两种品系的水稻杂交存在败育现象，其中甲品系水稻的12号染色体上含有毒蛋白基因（ORF2）和解毒蛋白基因（ORF3），两者不能发生交换，乙品系的水稻只含有无功能的毒蛋白基因（ORF2-），且无ORF3基因。甲和乙杂交产生的F1花粉母细胞形成成熟花粉的过程如下图所示，检查发现F1花粉中均存在某种杀死花粉的毒蛋白。下列叙述错误的是（ ）
A、ORF2基因在减数分裂Ⅰ完成前表达，导致携带ORF2-的花粉败育 B、ORF2基因在减数分裂Ⅱ开始表达，导致携带ORF2-的花粉败育 C、甲乙杂交种自交后代中12号染色体都来自品系甲的个体占1/2 D、ORF3基因的功能是抑制ORF2基因的转录过程 -
7、为应对全球变暖导致的高温胁迫，开发新型生物能源，某研究团队以真核微藻为模型，在低氧环境中探究光抑制的缓解机制。研究发现：当光能过量时，PSⅡ中电子（e-）积累会产生活性氧破坏PSⅡ；而低氧条件下，叶绿体内氢化酶活性提高，部分电子（e-）流向生成氢气的代谢过程（图甲）。团队采用“非基因方式电子引流”策略，利用人工电子梭铁氰化钾接收多余电子，有效解除光抑制（图乙）。下列叙述正确的是（ ）
A、光抑制发生时，PSⅡ中积累的电子产生的活性氧，会直接阻碍CO2的固定过程 B、低氧环境中，氢化酶活性提高使部分电子用于H2生成，减少了用于NADPH合成的电子，导致碳固定效率降低 C、铁氰化钾作为人工电子梭，能接收PSⅡ积累的电子，避免活性氧产生，从而维持PSⅡ功能完整性 D、从图乙可知，当光照强度由I1增加到I2时，对照组的光能转化效率下降 -
8、群落中不同物种或种群的数量随时间波动是否同步对稳定群落总生物量或总数量有着很显著影响，是生态系统稳定性得以维持的关键因素之一。某研究小组对甲、乙两个森林群落进行长期监测，得到两个群落中主要物种种群数量及群落总数量随时间的变化曲线（如图）。下列叙述正确的是（ ）
A、群落甲中各物种波动高度同步，总生物量更稳定 B、群落乙中不同物种的数量随时间波动不同步、相互抵消，从而稳定群落总生物量 C、自然群落中的各种群均可呈现“J”形增长，达到K值后种群数量保持不变 D、群落丰富度的统计方法中，目测估计法适用于个体较大、种群数量有限的种群的计数 -
9、人体通过神经—体液—免疫调节网络维持内环境稳态。下列关于稳态调节机制的叙述，正确的是（ ）A、血浆渗透压的大小主要取决于血浆中蛋白质的含量，无机盐的作用较小 B、寒冷环境中，交感神经兴奋直接支配肾上腺髓质，使其分泌肾上腺素以增加产热 C、抗利尿激素由垂体合成并释放，作用于肾小管和集合管以促进水的重吸收 D、体液免疫过程中，T细胞分泌的细胞因子能促进B细胞增殖分化为浆细胞和记忆细胞
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10、科学家研究了药物X和dATP（d表示脱氧）与海拉细胞（一种癌细胞）凋亡的关系，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A、细胞凋亡是指由环境所决定的细胞自动结束生命的过程 B、仅用dATP处理也能显著促进海拉细胞凋亡 C、有dATP时，随着药物X用量的减少，其促进海拉细胞凋亡的效果逐渐增强 D、药物X促进海拉细胞凋亡的过程中，细胞膜通透性会发生改变，细胞发生有序解体 -
11、2025年某药企利用CHO细胞（中国仓鼠卵巢细胞）表达重组人源化抗PD-1抗体，为提高产量，对抗体基因进行密码子优化，将抗体轻重链基因的稀有密码子替换为CHO细胞偏好的密码子，同时在载体中加入强启动子。下列叙述正确的是（ ）A、重组载体导入CHO细胞并发育为转基因动物，从而获得PD-1抗体 B、强启动子能促进抗体基因在CHO细胞中完成转录过程，从而增加基因数量，进而增加抗体数量 C、该抗体的合成过程需要内质网与高尔基体参与，抗体合成分泌的过程体现了生物膜的直接联系 D、密码子优化可使抗体基因的密码子与CHO细胞的密码子偏好性相匹配，提高翻译效率
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12、ATP合酶是一种与生物膜结合的功能蛋白，能催化ATP合成。根据其作用机理（见下图），下列叙述正确的是（ ）
A、GTP（三磷酸鸟苷）能为细胞供能，是因为其分子结构与ATP相似，含有两个特殊化学键，且远离鸟苷的键易水解释放能量 B、H+跨膜的运输方式为主动运输，因其需ATP合酶载体协助且消耗能量 C、好氧性细菌因无细胞器，故ATP合酶无法催化ATP合成，需依赖细胞质基质中的酶 D、在植物细胞中，ATP合酶仅分布于线粒体内膜上 -
13、下列相关实验叙述正确的是（ ）A、孟德尔推测出“测交后代中高茎与矮茎的数量比为1∶1，”这属于假说—演绎法中的“实验验证” B、梅塞尔森与斯塔尔证明“DNA半保留复制”的实验中，也用到了假说—演绎法 C、用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌，离心后得到的沉淀物中放射性高 D、“低温诱导染色体数目变化”的实验中，需要用卡诺氏液使细胞分散开来
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14、2025年，三位科学家因在调节性T细胞调控机制领域的突破性发现荣获诺贝尔生理学或医学奖。调节性T细胞能阻止免疫系统错误攻击自身组织，他们的研究首次阐明了核心转录因子FoxP3在维持免疫耐受中的关键作用，发现FoxP3是调控调节性T细胞发育、分化和功能的核心转录因子，也是调节性T细胞的特异性标志，其相关功能是免疫耐受调控的关键，并开发出基于FoxP3靶向调控的自身免疫疾病治疗策略。基于该获奖成果，下列关于免疫调节的叙述，正确的是（ ）A、FoxP3基因功能缺失会引发免疫缺陷病，导致机体对病原体的清除能力显著下降 B、调节性T细胞的产生、发育及成熟全过程均在骨髓中完成 C、通过小分子药物特异性增强调节性T细胞活性，可有效抑制类风湿关节炎等自身免疫疾病的进展 D、细胞毒性T细胞攻击自身组织时，被攻击细胞的死亡方式属于坏死，该过程伴随细胞膜破裂和炎症反应
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15、为研发针对某病毒变异株的中和抗体，某生物制药企业采用杂交瘤技术进行单克隆抗体制备。在实验过程中，技术人员需通过两次关键筛选获得目标杂交瘤细胞。下列关于该过程的叙述，正确的是（ ）A、第一次筛选的目的是直接获得能分泌所需要的特异性抗体的杂交瘤细胞 B、第二次筛选前需对杂交瘤细胞进行克隆化培养，再利用抗原—抗体杂交技术鉴定目标细胞株 C、将新冠病毒S蛋白注射到小鼠体内后，应从小鼠骨髓中分离经免疫的B淋巴细胞用于融合 D、杂交瘤细胞体外培养时，需通入95%的纯氧和5%的二氧化碳，以满足高耗氧细胞的呼吸需求
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16、某农业科技公司为抢救濒危药用植物“红豆杉”，启动了组织培养快速繁殖项目。在实验中，技术人员发现：当外植体取自树皮部位时，脱毒效果差；而取自茎尖分生组织时，可获得高纯度脱毒苗。同时，为研究生殖细胞全能性，团队还进行了花粉离体培养实验。下列关于该过程的叙述，错误的是（ ）A、外植体脱分化过程中，细胞逐渐失去原有形态和功能特异性，形成不定形的薄壁组织团块 B、再分化阶段，若培养基中细胞分裂素与生长素比例较高，则有利于芽的形成，但会抑制根的发育 C、单倍体植株幼苗经秋水仙素处理后恢复可育性，体现了植物生殖细胞的全能性 D、选择茎尖分生组织作为外植体获得脱毒苗，是因为该区域的病毒极少，甚至无病毒
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17、R环是转录过程中形成的三链核酸结构，新生RNA与DNA模板链配对形成RNA-DNA杂交链，同时将非模板DNA链挤出成单链。研究发现，某些基因的高表达易诱发R环积累，进而引发DNA损伤。科学家构建了RNase H1过表达的转基因小鼠，发现其神经元中R环水平显著降低，基因组稳定性提高。下列分析合理的是（ ）
A、R环中RNA与DNA模板链通过氢键结合，其稳定性高于DNA双螺旋 B、RNaseH1过表达可彻底消除细胞内所有R环，完全避免DNA损伤 C、转录时若加入解旋酶抑制剂，将阻断R环形成，从而保护DNA完整性 D、R环区域的单链DNA更易发生碱基修饰或断裂，是基因组不稳定的重要诱因 -
18、关于生物进化与物种形成的相关叙述，错误的是（ ）A、物种形成过程中，地理隔离是生殖隔离的必要条件 B、突变和基因重组为生物进化提供原材料，但不决定进化方向 C、比较不同生物的细胞色素c氨基酸序列差异，可推测它们的亲缘关系远近 D、捕食者的存在能促进被捕食者种群的发展，有利于生物多样性的形成
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19、低氧诱导因子脯氨酰羟化酶（HIF-PH）通过催化HIF-α亚基的羟基化进而使之降解，使人在高原低氧环境下表现出高原反应。罗沙司他是一种低氧诱导因子脯氨酰羟化酶（HIF-PH）抑制剂，通过抑制HIF-α亚基的羟基化降解，使其稳定入核，激活促红细胞生成素（EPO）等靶基因转录，促进红细胞生成，从而缓解高原反应。该药为肾性贫血治疗提供了不依赖外源性EPO注射的新策略。下列关于罗沙司他作用机制及相关生理调节的叙述，错误的是（ ）A、罗沙司他通过调控HIF-α的稳定性，间接影响EPO基因的转录水平 B、EPO经血液运输至骨髓，与造血干细胞膜上特异性受体结合后发挥效应 C、人体处在高原反应状态时，肾脏细胞HIF-α羟基化程度升高以增强EPO合成 D、罗沙司他模拟生理性低氧应答，体现了“结构—功能—稳态”相适应的生物学观念
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20、如图为某实验小组观察洋葱（2n＝16）根尖分生组织细胞有丝分裂时拍摄的显微照片，①②为处于不同分裂时期的细胞。下列相关分析正确的是（ ）
A、细胞①处于有丝分裂中期，其染色体数、染色单体数、核DNA分子数分别为16、32、32 B、细胞②所在时期可发生同源染色体的非姐妹染色单体片段互换 C、制作洋葱根尖有丝分裂装片时，延长解离时间能使细胞分离更彻底，利于观察 D、通过统计视野中各时期细胞数量，可得出有丝分裂各时期的具体时长