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1、人生长激素（hGH）在人体生长和发育过程起重要作用，临床治疗所需的hGH类药物大多是通过大肠杆菌表达系统生产的。科研工作者为了避免原核表达系统的局限性，构建了毕赤酵母表达系统，如图所示。pPIC9K质粒上的5'AOX1属于诱导型启动子，受体细胞在以甲醇为唯一碳源时，可激活基因的表达。相关限制酶识序列及酶切位点如下表所示。
限制酶
SacI
SnaBI
AvrII
识别序列及酶切位点
回答下列问题：
(1)、步骤①中优化基因序列的方法是根据密码子的特点，用酵母菌偏好的密码子替换原hGH基因表达中使用率不高的密码子，在不改变氨基酸序列的情况下提高基因表达水平。(2)、步骤②选用限制酶SnaBI和AvrI切割质粒，为了使hGH基因与载体能正确连接，在扩增hGH基因时，需在引物的（填“3'端”或“5'端”）添加限制酶识别序列用酶连接后，形成重组质粒。(3)、研究者分别用Sacl，SnaBI和AvrI对重组质粒进行单酶切和双酶切，产物电泳结果如图所示。据图判断是否成功获得了“pPIC9K-hGH重组质粒”，并说出判断依据。
(4)、培养转化酵母细胞时，加入甲醇的目的是。研究发现，在相同培养条件下，不同的阳性转化菌的hGH产量不同，除酵母菌代谢情况不同外，可能的原因还有。(5)、相比毕赤酵母表达系统，通过大肠杆菌表达系统生产hGH的局限性是。 -
2、“TK-GCV”系统是一种特异性自杀基因系统。TK基因导入宿主细胞产生的TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦（GCV）转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，最终使细胞凋亡。某研究团队将“TK-GCV”应用于奶山羊育种中，操作流程如图所示。
回答下列问题：
(1)、TK酶通过抑制酶的活性而影响细胞分裂。为了获得更多的卵母细胞，需对奶山羊乙注射 ， 并将获得的卵母细胞培养至期去核，去核的目的是对早期胚胎移植前需对奶山羊丙进行处理。(2)、为了检测图中转基因奶山羊TK基因是否成功表达，可采用的检测方法是 ， 检测结果显示细胞中TK基因正常表达，但细胞仍能正常分裂，原因是。(3)、研究者将TK基因插入奶山羊的Y染色体上，分析此研究中“TK-GCV”自杀基因系统在奶山羊育种中的意义是。 -
3、荔枝享有“岭南果王”的美誉，但存在上市周期短、难储存、易腐败等问题研究人员采用生物发酵技术获得荔枝发酵产物，发酵流程如图所示。与荔枝相比其发酵产物更易保存，且具有较强的抗氧化活性。
(1)、一级发酵过程中，研究者通过法进行菌落计数发现，发酵前期乳酸菌生长缓慢其原因可能是。发酵24小时后，酵母菌的发酵产物蛋白质、氨基酸可以为乳菌提供 ， 从而促进乳酸菌的生长。由于醋酸杆菌在条件下，可以直接利用酒精，使荔枝二级发酵产物达到了无醇饮料的标准。(2)、当皮肤遇到外界有害因素（辐射、紫外线等）时，组织内会产生活性氧（ROS），引起机体氧化损伤，最终导致皮肤衰老。为探究荔枝发酵物对人细胞中ROS的影响，研究人员以永生化表皮细胞（HaCaT细胞）为材料进行了相关实验，其中对照组用无低清培养基处理，甲、乙、丙组用150μmolL的H2O2进行氧化损伤造模后，再分别用低中、高浓度荔枝发酵物处理。结果如图所示。
①获取HaCaT细胞后用酶处理获得细胞悬液，然后置于CO2培养箱中孵育30min，孵育的过程中需 ， 以便清除代谢废物。
②实验中模型组的处理为。
③上述实验结果表明：。
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4、现代城市规划设计中有不少水最设计，但因其水体流动性差，一旦受到污染很难自行修复，易造成水质恶化。研究者以佛山祖庙内的锦香池景观水体养护工程为例开展了为期3年的水质调查，部分调查结果如图所示。
(1)、锦香池作为祖庙中一处观赏性极强的园林景观，成为人们了解和研究岭南园林艺术的重要实物材料，这体现了生物多样性的价值。(2)、大多数人造景观水体都是半封闭或基本封闭的系统，且因其 ， 生态系统的稳定性较差。3年的调查中，锦香池水体共出现3次水质恶化，从干扰因素对水质影响的角度分析，得出的结论是。放生泥鳅、鱼、乌龟等并投放大量的饲料可能引起水体发黑发臭，试分析其中的原因。(3)、在实施水体养护工程时需要兼顾技术可行、经济有效，且合乎城市生态要求，这主要体现了生态工程建设的原理。(4)、结合锦香池景观水体的特点及调查结果，为同类景观水体的维护治理提出建议（答两点即可）。 -
5、我国科研人员利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除了水稻香味抑制基因Badh2，获得了有香味的水稻，机理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A、sgRNA的识别序列过短可能会导致编辑对象出错 B、Cas9蛋白功能类似于限制酶，可以识别并剪切特定DNA片段 C、在培养基中加入潮霉素，可用于筛选导入基因敲除载体的植物细胞 D、构建好的基因敲除载体可用农杆菌转化法导入水稻细胞 -
6、双抗体夹心法是常用的检测抗原含量的方法，流程如图所示。其中固相抗体是由固相载体连接后的单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ）
A、将抗原A注射到小鼠体内，可从脾脏中获得相应单克隆抗体 B、固相抗体的使用数量应多于待测抗原的数量 C、需给予足够长的时间使无色底物充分反应后检测光信号 D、反应体系中光信号越强（颜色越深）则抗原A含量越低 -
7、油菜容易被线虫侵染而造成减产，萝卜具有线虫病基因。研究发现，两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。科研人员以萝卜细胞（2N=18）和油菜细胞（2N=38）为亲本进行细胞杂交，通过图所示的途径获得抗虫油菜。下列叙述正确的是（ ）
A、X射线照射处理的目的是诱发萝卜细胞基因突变 B、融合原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染 C、须在同一培养基上将愈伤组织先诱导生芽，再诱导生根 D、抗虫油菜为二倍体，减数分裂时一个细胞可形成19个四分体 -
8、连续发酵是指以一定的流速向发酵罐中连续添加培养基，同时以相同的流速排出发酵液的发酵方法。某研究团队通过实验探究不同发酵方法对大肠杆菌分泌L-酪氨酸的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A、培养基加入发酵罐之前常用湿热灭菌法进行无菌处理 B、发酵过程中需要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件 C、发酵后采用离心法分离菌体，通过破碎细胞获取L-酪氨酸 D、连续发酵可提高菌体活力，延长产L-酪氨酸的周期 -
9、沼气工程以牲畜的粪便等为发酵原料生产沼气，不仅可以有效解决燃料不足问题，还为饲料、肥料开辟了新的来源，对节省林木和保护林草植被也具有重要意义。下列叙述正确的是（ ）A、发酵池中的硝化细菌可将粪便中的氨转化为硝酸盐供植物利用 B、沼气工程的实施能够增大生态足迹，有利于人类可持续发展 C、沼气工程实现了能量的循环利用，大大提高了能量的利用率 D、沼气工程在一定程度减轻了环境污染，主要遵循了协调原理
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10、《佛山市河心岛生态修复工作方案》指出，全市开展河心岛生态修复工程，将市里48个河心岛建设成为生态平衡、环境优美、物种多样的生态岛，总体实现“再现绿水青山”的建设目标。下列叙述错误的是（ ）A、该生态修复工程以生态系统的自组织和自我调节功能为基础 B、河心岛生态修复中，适当增加物种数量有助于提高其生态系统稳定性 C、河心岛生态系统的作用体现出生物多样性的直接价值明显大于间接价值 D、人类活动会影响河心岛群落演替的速度和方向
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11、研究人员从生活在寒带的比目鱼中获取抗冻蛋白基因并导入番茄细胞，以期获得抗冻番茄。图示对转基因细胞的检测流程。下列叙述正确的是（ ）
A、DNA提取中研磨时添加纤维素酶利于细胞DNA的释放 B、用PCR技术扩增目的基因时，需要提前知道基因的全部序列 C、凝胶的浓度不会影响电泳中DNA的迁移速率 D、基因检测呈阳性的细胞经植物组织培养即可得到抗冻番茄 -
12、PCR技术在科研实践中有着广泛的应用，PCR过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A、变性是指通过高温使双链DNA解聚为单链 B、图中55℃复性的目的是使引物与模板结合 C、在30次循环的过程中，DNA边解旋边复制 D、TaqDNA聚合酶在延伸过程中发挥作用 -
13、生物技术的安全性和伦理问题已经成为广受关注的社会热点。下列技术或要求不符合安全与伦理规范的是（ ）A、利用核移植技术获得造血干细胞，用于白血病治疗 B、利用基因组编辑技术设计试管婴儿，解决不孕不育问题 C、禁止生殖性克隆人，以防破坏人类基因多样性的天然属性 D、研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播
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14、2023年世界人工智能大会上，首个基于AI的蛋白质生成模型正式亮相，它能通过AI学习蛋白质序列和功能间的对应关系，根据预期功能直接设计出新蛋白质，为蛋白质工程发展提供了新方向。下列叙述正确的是（ ）A、蛋白质工程操作流程与遗传信息的流动方向相同 B、蛋白质工程需改变蛋白质分子中全部氨基酸序列 C、蛋白质工程和基因工程都需要构建基因表达载体 D、AI高效设计蛋白质须以碱基互补配对原则为基础
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15、图示基因工程操作时用到的质粒，图中不同数字代表不同酶切位点。用此质粒构建基因表达载体时，选用限制酶的最佳组合是（ ）
A、1和2 B、1和3 C、2和4 D、3和4 -
16、自1978年首例“试管婴儿”诞生后，体外受精技术已在全球广泛使用。相对于自然受孕的子代，体外受精子代更容易出现妊娠不良现象。为探究胚胎移植时胚胎发育状况对移植成功率的影响，研究人员用处于不同发育阶段的囊胚开展了相关实验，结果如下表所示。下列叙述错误的是（ ）
组别
未孵化
孵出面积<5%
孵出面积5%-10%
妊娠率（%）
45.3
52.5
29.7
A、胚胎移植时，胚胎所处发育阶段并非越早越好 B、囊胚中的内细胞团和滋养层细胞核基因相同，但全能性高低不同 C、移植孵出面积超过5%的囊胚可能造成囊胚损伤，降低移植成功率 D、孵出面积较大的囊胚移植成功率低可能与子宫内膜的免疫排斥有关 -
17、将单克隆抗体同药物耦联可以实现对病原体或肿瘤细胞的选择性杀伤。在单克隆抗体的制备过程中不涉及的操作是（ ）A、动物细胞融合 B、细胞核移植 C、动物细胞培养 D、筛选杂交瘤细胞
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18、客家娘酒是采用优质糯米，经蒸煮、发酵、炙酒而成的一种甜米酒，发酵过程中使用的酒曲含有根霉、酵母菌等微生物，其中根霉在生长时会产生大量的淀粉酶。下列关于酿酒过程的叙述，错误的是（ ）A、客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，可促进微生物的繁殖 B、炙酒是指用暗火烤炙密封的米酒，可以延长娘酒储存的时间 C、根霉将糯米中的淀粉转化为小分子糖类，为酵母菌生长提供碳源 D、随着酒曲中根霉比例的增大，酵母菌酒精发酵的速度也会加快
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19、1928年，格里菲思用肺炎链球菌在小鼠体内进行著名的转化实验如图1所示；紧接着艾弗里团队在体外证明DNA是遗传物质的实验过程如图2所示：随后1952年美国遗传学家赫尔希和助手蔡斯完成了另一个有说服力的实验——T2噬菌体侵染细菌实验如图3所示，请回答下列有关问题：
(1)、格里菲斯通过图1的四组实验结果得出什么实验结论？。(2)、图2实验中，两组（填序号）对照可以证明S型活细菌的DNA是转化因子。(3)、图3实验能检测到放射性是因为利用了法。图中的噬菌体被标记的部位是（填“DNA”或“蛋白质”）。(4)、图3实验中被标记的噬菌体与未标记的细菌混合过后还要保温一段时间，然后再进行后续操作。①如果保温时间过短，被标记的噬菌体（填“能”或“不能”）全部侵染到细菌体内，会使上清液中放射性含量。
②如果保温时间过长，会使上清液中放射性含量 ， 其可能的原因是。
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20、学习以下材料，回答（1）~（5）题。
果蝇白眼基因突变体的研究
黑腹果蝇眼的颜色与红色色素和棕色色素在色素细胞中的合成有关。鸟嘌呤为红色色素合成的原料，色氨酸为棕色色素合成的原料。
鸟嘌呤和色氨酸均通过转运复合体转运到色素细胞中。在黑腹果蝇色素细胞内，构成转运复合体的蛋白由白色基因、猩红色基因和棕色基因编码。遗传和生化证据表明，白色基因和棕色基因的表达产物（白色亚基和棕色亚基）共同形成鸟嘌呤转运复合体；白色基因和猩红色基因的表达产物（白色亚基和猩红色亚基）共同形成色氨酸转运复合体。
科研人员通过诱变获得了4个白色基因突变体w1~w4 ， 它们均由于碱基序列发生改变，导致白色亚基中单个氨基酸改变，使白色亚基的分子结构发生改变，影响转运复合体的功能。测定w1~w4眼的色素含量，以野生型眼的色素含量为参照，得到下图所示结果。
通过分析w1~w4的白色亚基中发生改变的氨基酸的所在位置，科研人员进一步揭示了白色亚基改变对鸟嘌呤转运复合体和色氨酸转运复合体的影响。
(1)、从基因控制生物性状的角度分析，本文内容体现了基因通过控制直接控制生物性状。w1~w4白色基因的不同突变，均为野生型的白色基因W的基因。(2)、据图分析，突变体的突变与眼的红色色素的大幅减少相关，而棕色色素接近野生型水平，推测发生改变的氨基酸所在的结构位点在转运复合体中的作用更重要。(3)、遗传学家摩尔根得到一只白眼果蝇，并通过与野生型（红眼）果蝇杂交，发现白眼性状为性状w1~w4中的与摩尔根得到的白眼突变体眼色最相似。(4)、依据本文分析、白眼性状出现的原因可能是。