相关试卷
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1、促红细胞生成素(EPO)是一种能刺激骨髓造血的糖蛋白类激素。生产重组人促红细胞生成素(rhEPO)时，需构建EPO基因(E基因)表达载体(如图所示)，并将E基因导入受体细胞CHO-DHFR- ， 通过细胞培养生产rhEPO。回答下列问题：
(1)、从人肝细胞中提取mRNA，以mRNA为模板采用RT-PCR方法扩增获得EPO的cDNA(E基因)时所需的酶是。PCR所需的引物如下：
引物P1、P2的作用是 ， 通常限制酶的酶切序列设计在引物的端。
(2)、用PBT质粒和E基因构建PBT-E表达载体时所需的酶是。某同学比较PBT和PBT-E的大小后，推测E基因的碱基长度为100 bp(bp表示碱基对)，该推测是否正确?请说明理由：。(3)、CHO-DHFR-为二氢叶酸还原酶缺失型细胞系细胞，只有在添加了次黄嘌呤和胸腺嘧啶的培养基上才能生长。将含有PBT-E与CHO-DHFR-细胞的培养液混合，完成转染，然后将细胞置于多孔培养板上，每个孔中最多有一个细胞，用选择培养基筛选。与正常动物细胞培养基相比，该培养基缺少的成分是。经选择培养，在多孔培养板上，有的孔中出现了由细胞分裂产生的细胞集落。为从这些细胞集落中筛选出能产生rhEPO的细胞，应怎样筛选?。(4)、工厂化生产rhEPO时，除营养条件外，还需满足的其他条件有。 -
2、为增加油菜种子含油量，科研人员尝试将酶D基因与叶绿体转运肽(引导合成的蛋白质进入叶绿体)基因连接(图甲)，导入Ti质粒(图乙)，最终获得转基因油菜品种。以下叙述错误的是( )
A、用ClaⅠ切割酶D基因和转运肽基因，再利用DNA连接酶连接获得目的基因 B、用XbaⅠ和SacⅠ同时切割目的基因和载体片段，连接后获得重组Ti质粒 C、将农杆菌接种在含卡那霉素的固体培养基上筛选成功导入Ti质粒的单菌落 D、转基因油菜的酶D基因只表达于含叶绿体的细胞，并在叶绿体内转录、翻译 -
3、利用细菌生产人的生长激素时，需将人生长激素基因与pBR322质粒结合，两者结构如图。下列叙述正确的是( )
注：AmpR为氨苄青霉素抗性基因，TetR为四环素抗性基因。
A、受体菌不能含有AmpR和TetR基因 B、提取目的基因应选择限制酶G和限制酶E的组合 C、生长激素基因与质粒结合的过程共形成了2个磷酸二酯键 D、用含氨苄青霉素的培养基只能筛选出含重组质粒的受体菌 -
4、对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现?原因是什么?。
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5、用PCR可以扩增mRNA吗?为什么?。
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6、目前在PCR反应中使用Taq DNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。
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7、基因表达载体中，目的基因的上游是启动子，启动子的作用是。
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8、构建基因表达载体的目的是。
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9、限制酶主要来源于原核生物，为什么不会切割自身DNA分子?。
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10、耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸。( )
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11、PCR扩增区域由2个引物来决定。( )
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12、PCR过程中，模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用。( )
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13、利用PCR扩增目的基因时，不需要知道目的基因的全部碱基序列。( )
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14、利用PCR技术扩增抗虫基因时，PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2+。( )
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15、PCR需要的原料包括脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和解旋酶等。( )
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16、PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供DNA模板及四种脱氧核苷酸即可。( )
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17、蛋白质工程合成所需蛋白质的过程，遗传信息的流向与中心法则相反。( )
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18、蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要。( )
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19、将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器。( )
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20、可利用抗原—抗体杂交检测棉花细胞是否成功表达抗虫基因。( )