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1、 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。
(1)、制备稀释100倍的土壤浸出液，需要将5g土样加入ml无菌水中。(2)、要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、成分方面来看，上述培养皿中培养基的特点是。(3)、在划线培养时需要对接种环进行灼烧灭菌，本实验理论上需要灼烧次。最终在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是 ， 有透明带菌落利用的氮源主要是 ， 据此可筛选出目的菌。(4)、科研人员为了进一步筛选出高降解能力的菌种，对上图得到的菌株再次进行纯化培养，测量不同菌株形成的菌落及透明圈直径，结果见下表。工程菌
菌落直径（C，mm）
透明圈直径（H，mm）
H/C
菌株I
8.1
13.0
1.6
菌株Ⅱ
5.1
11.2
2.2
菌株Ⅲ
9.5
17.1
1.8
根据表中数据，可推断其中降解除草剂能力最高的菌株是。
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2、 桂圆也称龙眼，是一种药食两用的水果，可用于生产果酒。科研团队比较了5种酵母菌（3种酿酒酵母，2种非酿酒酵母）对桂圆果浆的发酵效果，并从中选择适宜的菌种进行发酵，以期得到品质更好的桂圆果酒。生产桂圆果酒的工艺流程如图所示。回答下列问题：
新鲜桂圆去皮去核→桂圆果肉→打浆→调酸→酶解→调糖→接种→发酵→过滤
(1)、在发酵流程中应增加“桂圆去皮去核之前进行清洗”环节，该操作的目的是。调好的果浆装瓶时，注意瓶中要留有大约的空间，盖好瓶盖。然后将温度控制在进行发酵。(2)、下表中表示5种酵母（Y1—SY果酒活性干酵母；Y2—RW果酒活性干酵母；Y3—葡萄酒高活性干酵母；Y4—耐高温高活性干酵母；Y5—生香活性干酵母）发酵的桂圆果酒品质（总酯与果酒的香味有关），根据表可得出的结论：应在5种酵母中选择两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。酵母
酒精度/%
总糖/（g/L）
总酸/（g/L）
总酯/（g/L）
Y1
13.4
1.3
6.8
0.19
Y2
13.1
2.4
6.4
0.18
Y3
13.3
1.6
6.2
0.15
Y4
12.6
3.4
8.1
0.11
Y5
11.0
8.5
7.6
0.38
(3)、酵母菌添加量过少时，可能导致或发酵失败。(4)、酿好的果酒可继续用于酿醋，其原理为（写出化学反应式）。 -
3、 “无废弃物农业”体现了我国古代劳动人民的勤劳和智慧，是我国古代传统农业的辉煌成就之一，也是生态工程最早和最生动的一种模式。“无废弃物农业”有很多类型，其中一种是把人畜粪便、枯枝落叶以及农产品加工过程中的废弃物等，采用堆肥和沤肥等多种方式，转变为有机肥料。
(1)、图中包含的生物所处的最高营养级为营养级。种植作物的农田可以看作是一个生态系统，在各种因素的调控下，该生态系统的和处于相对稳定的状态，农田便达到了生态平衡。(2)、“无废弃物农业”作为生态工程，遵循的基本原理有。(3)、结合图文内容可知：其中的“废弃物”主要包括 ， 通常情况下，它们不再沿着食物链参与生态系统的功能。 -
4、 下图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述错误的是（ ）
A、若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B、若上图表示利用胚胎工程繁殖试管牛的操作流程，若要进一步增大良种牛的繁殖数量可对胚胎4进行分割处理 C、若上图表示单克隆抗体的制备流程：用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，并未破坏其抗原结构 D、若上图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质层的融合过程，完成融合的标志是再生新的细胞壁 -
5、 下列有关生态学实验的叙述，正确的是（ ）A、统计土壤样品中个体较大、数量有限的小动物时，常采用目测估计法 B、“探究土壤微生物对落叶的分解作用”实验中，应将对照组土壤放进60℃恒温箱处理 C、“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，先滴加样液后盖盖玻片可能会造成实验数据偏大 D、“设计并制作生态缸，观察其稳定性”实验中，生态缸应置于光线良好、阳光直射之处
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6、 关于以下叙述，正确的有几项( )
⑴细胞凋亡时，溶酶体可合成和分泌多种水解酶
⑵吸能反应一般与ATP的合成相联系
⑶突变基因一定由物理、化学或生物因素诱发
⑷非同源染色体随雌雄配子的随机结合而自由组合，其上的非等位基因也自由组合
⑸效应T细胞与靶细胞结合后可激活效应T细胞内的溶酶体酶
⑹建立动物园、植物园等是对生物多样性最有效的保护措施
A、零项 B、一项 C、二项 D、三项 -
7、 动物细胞核移植技术可以用来探讨遗传、发育和细胞分化等方面的一些问题。下列相关叙述错误的是（ ）A、将该技术用于优良动物的克隆，可使某种性状的个体数量增加 B、哺乳动物体细胞核移植的难度明显低于胚胎细胞核移植的难度 C、克隆遗传背景相同的动物，可通过它们之间的对比来分析致病基因 D、克隆特定疾病模型的动物，利于研究致病机理以及开发合适的药物
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8、 酒精是生物学实验中常用的试剂。下表列出了酒精在实验中的作用，表述错误的选项共有（ ）
选项
实验
酒精的作用
①
菊花的组织培养
工作台、外植体、培养基等的消毒
②
绿叶中色素的提取
溶解绿叶中的色素
③
检测生物组织中的脂肪
洗去浮色
④
观察植物根尖分生区组织细胞的有丝分裂
酒精和卡诺氏液一起制成解离液
⑤
研究土壤中小动物类群的丰富度
防止小动物尸体腐烂
A、1项 B、2项 C、3项 D、4项 -
9、 下列生物工程技术中，不需要用到胚胎移植技术的是（ ）A、利用本地黄牛克隆繁殖优质高产奶牛 B、利用乳腺生物反应器生产生长激素 C、利用诱导多能干细胞治疗阿尔兹海默症 D、利用试管婴儿技术辅助有生育困难的夫妇
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10、 实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A、甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B、乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开 C、丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象 D、丁过程表示传代培养，传代培养的正常动物细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 -
11、 下列技术或方法与原理相符的是（ ）A、植物组织培养和动物细胞培养——细胞增殖 B、纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性 C、早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D、人参细胞的大量培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性
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12、 研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中（“+”代表含抗生素，“+”的多少代表抗生素浓度，“-”代表不含抗生素），对两种抗生素的药性进行分析。在37℃环境下培养24小时后，细菌生长情况如图。下列叙述正确的是（ ）
A、长期使用抗生素A可能会诱导结核杆菌产生抗药性变异 B、与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B的抑菌作用更强 C、为排除杂菌的影响，倒平板前可对培养基采用煮沸灭菌或者高压蒸汽灭菌 D、该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培筹 -
13、 某兴趣小组研究放牧对草场物种丰富度的影响，结果如图所示。下列分析正确的是（ ）
A、调查物种丰富度时，需对采集到的数据取平均值 B、随着放牧强度的增加，并不影响该地区植物物种丰富度 C、维持牧草和放牧数量的适宜比例，高寒草甸不会发生演替 D、过度放牧会导致群落结构改变，影响生物多样性的间接价值 -
14、 下列信息传递的实例中，属于调节生物种间关系的是（ ）A、草原返青时，“绿色”为食草动物提供信息 B、昆虫散发性外激素传递信息 C、莴苣在适宜波长的光下才能萌发生长 D、雄鸟求偶时进行复杂的“求偶”炫耀
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15、 生态系统的物质循环包括碳循环和氮循环等过程。下列有关碳循环的叙述，错误的是（ ）A、消费者没有参与碳循环的过程 B、生产者的光合作用是碳循环的重要环节 C、土壤中微生物的呼吸作用是碳循环的重要环节 D、碳在非生物环境与生物群落之间主要以CO2形式循环
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16、 炎症性肠病（IBD）是一种易导致结肠癌的慢性疾病，患者肠道内会产生硫代硫酸盐。科研人员以小鼠为研究对象，建立了下图所示的炎症性肠病检测模型，GFP基因是绿色荧光蛋白基因。
(1)、据图分析，可以通过检测荧光强弱来判定小鼠肠道内硫代硫酸盐的浓度，其原因是。(2)、研究者利用基因工程技术构建含硫代硫酸盐检测传感器的大肠杆菌工程菌，通过PCR扩增R基因时应该选择的引物是 ， 在A、B两端引物的5'端需添加的限制酶识别序列为和。限制酶识别序列和酶切位点如下表：
限制酶
HindⅢ
BamHⅠ
PstⅠ
EcoRⅠ
BglⅡ
识别序列（5'→3'）
A↓AGCTT
G↓GATCC
C↓TGCAG
G↓AATTC
A↓GATCT
(3)、研究发现患者肠道内硫代硫酸盐的生成量与疾病严重程度呈正相关。为简化疾病诊断和精确用药，科研人员开发了智能工程菌。科研人员将抗炎蛋白基因与硫代硫酸盐特异性诱导激活的启动子P连接，构建出下图所示表达载体（部分片段），导入用处理的大肠杆菌细胞内，选用启动子P的优点是。
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17、 图1表示利用基因工程制备某种病毒单克隆抗体的操作流程，过程①的mRNA序列为：5'-AUCUAUGCGCUCAUCAG…（中间省略3n个核苷酸序列）…CGCAGCAAUGAGUAGCG-3'。图2表示遗传信息传递过程中发生碱基配对的部分片段示意图。请回答下列问题：
(1)、图1中，过程①所用的mRNA只能从病毒感染者的细胞中提取。过程②需要的酶是。在重组质粒中，目的基因两侧必须具有的核苷酸序列，以保证目的基因在受体细胞中成功表达。过程①—⑦中遵循碱基互补配对原则的有 ， 需要依赖于生物膜的结构特点而完成的是。(2)、科研人员发现，某次制备获得的单克隆抗体氨基酸数目比mRNA正常编码的氨基酸数少了2 个。检测发现，目的基因在复制过程中有一对碱基发生了替换，该对碱基对应于mRNA的上述已知序列中，则目的基因中发生了替换的碱基对是（请将转录模板链碱基写在前面，已知起始密码子是AUG，终止密码子是UAA、UAG、UGA）。(3)、图1过程⑥中核糖体的运动方向为 （选填“从左往右”或“从右往左”），图2所示物质彻底水解，可获得种不同的小分子物质。(4)、筛选出单克隆抗体后，为满足生产上的需要对其进行改良，这种技术属于工程，该工程的起点是。 -
18、 人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：
(1)、人参与西洋参杂交存在花期不遇、F1代结实率低及难获得F2代的现象，说明两者之间存在 ， 是两个不同的物种。人参和西洋参含有人参皂苷，可以作为药物，体现了生物多样性的价值。(2)、过程①称为。过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是。(3)、科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见下图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。杂种胚中的大多数种类的皂苷的含量均高于其他两种，这体现了。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择的愈伤组织。
(4)、科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果：①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是。培养条件为5%CO2 ， 作用是、饱和湿度，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。
②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式：。根据实验结果可以得出的结论有。
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19、 科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如图1所示。请回答下列问题。
(1)、科研人员将抗原α、β分别注射到不同的小鼠体内，引起机体发生免疫，其中的分泌相应抗体。(2)、制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，分别经过两次筛选得到两种杂交瘤细胞，其中第一次筛选一般用 培养基，以筛选出。细胞培养时，需在培养液中加入（天然成分），且置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是。如果将得到的两种杂交瘤细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。(3)、结合所学知识，应用于肿瘤治疗的双特异性抗体的特点是。 -
20、 中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。请回答问题。
(1)、为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为 ， 并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中宜采用法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了105倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1mL，平板上的平均菌落数为220个，则菌液中H菌的细胞数为 个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是。(2)、发酵装置中搅拌器的作用是。(3)、基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是 。