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1、CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形成复合体。复合体中的sgRNA可与目的基因互补配对。复合体在sgRNA引导下结合目的基因，Cas9蛋白切割目的基因造成双链断裂，细胞在修复断裂的DNA时会随机插入、删除或替换部分碱基对，从而对DNA进行修复，其过程如图1所示。MLO基因是一类广泛存在于植物中的基因，其参与植物的感病性以及植物的生长发育调控，大量研究表明，mlo突变体可以增强植物对白粉病的抗性。实验小组构建了如图2所示的载体，导入细胞中通过定点编辑MLO基因提高了葡萄对白粉病的抗性，回答下列问题：
(1)、CRISPR/Cas9基因编辑系统中，Cas9蛋白能切割靶点DNA的两条链，形成DNA双链断裂缺口，而后机体会激活细胞内的自我修复机制，该修复过程可能会发生（填可遗传变异类型）。sgRNA会因错误配对而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越 ， 脱靶率越低。(2)、该研究中将目的基因导入葡萄组织细胞的方法为 ， 为了筛选T-DNA是否导入目的基因，应在选择培养基上加入。NLS为核定位序列，构建基因表达载体时将Cas9序列导入到NLS间，目的是。(3)、在个体水平鉴定时，可通过方法来检测葡萄植株的白粉病抗病性。经研究发现被敲除的葡萄表现出明显的白粉病抗性，你认为敲除MLO基因后，除了其对白粉病的抗性，还需要考虑哪些问题（试列举2点）。 -
2、野生黑果枸杞作为天然野生植物，不仅花青素含量最高，其营养价值和经济价值也高于宁夏枸杞。相比于宁夏枸杞，黑果枸杞抗旱、抗病虫害等能力更强，但是野生资源的生长容易受到限制，且其果实个体小，产量低。研究人员利用体细胞杂交技术将野生枸杞的抗逆遗传性状转移到栽培枸杞中，为枸杞品种选育提供有用材料，其培育过程如图所示。回答下列问题：
注：紫外线（UV）处理可破坏染色体结构，使染色体断裂、消失；IOA处理能抑制细胞分裂，使细胞分裂受阻。
(1)、获得杂种植株时，过程①获得原生质体需要用处理植物组织细胞，过程②应在等渗溶液——甘露醇中进行，其目的是。(2)、研究发现远缘体细胞杂交往往出现双亲染色体排斥及随机丢失现象，该杂交实验中用UV处理野生枸杞的原生质体破坏染色体结构，使其断裂、消失的目的是 ， IOA处理能抑制宁夏枸杞原生质体的细胞分裂，融合的杂种细胞由于获得来自野生黑枸杞原生质体的（填一种细胞器），从而为细胞的继续分裂提供能量。(3)、研究人员对两种枸杞及杂种枸杞的过氧化氢同工酶（功能相同，但分子结构、理化性质不同的一组酶）进行电泳，电泳的实验结果如下图所示。
分析结果，融合的原生质体缺乏某些来自黑果枸杞的过氧化氢酶的原因可能有。已知过氧化氢同工酶在清除植物体内过氧化氢、保护细胞免受氧化损伤方面起重要作用。试分析通过体细胞杂交技术提高了宁夏枸杞抗逆性的原因。
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3、科研人员将目的基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。再随机挑取3个品系细胞，在不同的引物组合下，通过PCR技术检测目的基因的导入情况（其中细胞3是按正确方向插入目的基因的质粒），结果如图2a和2b所示，下列有关叙述错误的是（ ）
A、图2a是利用F1和R2扩增的结果 B、图2b是利用F1和F2扩增的结果 C、细胞1的质粒中未插入目的基因 D、细胞2中质粒未导入正向的目的基因 -
4、Sau3AⅠ和BamHⅠ是两种限制酶，其识别序列和切割位点如下表所示。某DNA分子同时含有两种限制酶识别位点，且经BamHⅠ切割后能形成1条DNA片段，经Sau3AⅠ和BamHⅠ同时切割后能形成3条大小不同的DNA片段，下列有关叙述中错误的是（ ）
限制酶
识别序列和切割位点
BamHⅠ
G↓GATCC
Sau3AⅠ
↓GATC
A、Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的部位都是DNA分子中的磷酸二酯键 B、经Sau3AⅠ和BamHⅠ同时切割后形成的部分产物可自身环化 C、单独用Sau3AⅠ切割能产生2个大小不同的DNA片段 D、未用限制酶处理时，该DNA分子中不含游离的磷酸基团 -
5、在基因工程中，为防止转基因花粉的传播导致基因污染，采取的下列措施中不合理的是（ ）A、将外源目的基因导入植物的叶绿体基因组中 B、培育雄性不育的作物品种作为目的基因的受体 C、提前或延迟转基因作物种植时间，以避开周围作物的花期 D、转基因作物的种植区域周围种植大量杂草，以吸收转基因花粉
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6、黄芪是我国的传统中药材，为了探究拮抗菌对黄芪根腐病真菌Fusarium的防控作用，研究人员采集黄芪的根际土壤样品，从样品中分离细菌，并采用平板对峙法筛选拮抗作用强的菌株，将Fusarium接种于培养基中央，分别在不同平板上接种待测菌，如图所示，下列有关叙述错误的是（ ）
A、筛选拮抗菌的平板上应加入抗生素，以防止外来杂菌干扰 B、平板上Fusarium真菌菌落越小，则拮抗菌的抗菌效果越好 C、应设置只接种Fusarium真菌，不接种待测菌的平板做对照 D、培养基上接种待测菌量以及和Fusarium真菌的距离应相同 -
7、为了增加植物铁蛋白的多样性，研究人员通过农杆菌介导将大豆铁蛋白基因转入水稻，并在水稻种子稳定表达了大豆铁蛋白基因，下列有关叙述中错误的是（ ）A、可从大豆种子细胞中获取铁蛋白基因，并利用PCR技术扩增 B、添加适量的酚类化合物，有利于大豆铁蛋白基因的成功转化 C、DNA分子杂交技术可检测水稻种子是否表达了大豆铁蛋白 D、可利用电泳法分离转基因水稻种子细胞中的大豆铁蛋白
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8、下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验中各种试剂作用的描述不恰当的是（ ）A、研磨液——促使细胞破裂，释放DNA分子 B、冷酒精——将DNA分子从溶液中析出 C、2mol/L的NaCl溶液——溶解蛋白质，分离出DNA D、二苯胺试剂——沸水浴后DNA显蓝色
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9、研究人员欲利用基因工程使家蚕分泌能发出绿色荧光的蚕丝，下列方法最合理的是（ ）A、将绿色荧光蛋白基因插入到蚕丝蛋白基因启动子下游 B、用绿色荧光蛋白基因替代细胞中的蚕丝蛋白基因 C、向表达蚕丝蛋白基因的受体细胞中导入绿色荧光蛋白基因 D、将蚕丝蛋白基因与绿色荧光蛋白基因融合后导入受体细胞
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10、如图表示实验小组培养某种细菌的结果，有关该接种方法下列叙述错误的是（ ）
A、接种时采用的接种工具是接种环 B、需要对接种工具进行3次灭菌 C、不能对培养液中细菌数目计数 D、可以对培养液中的菌株分离纯化 -
11、科研人员利用蛋白质工程对植物体内的抗旱蛋白进行改造，使其能够更有效地调节植物细胞内的渗透压，提高植物在干旱条件下的保水能力，该过程中直接改造的对象是（ ）A、抗旱蛋白本身 B、抗旱蛋白基因 C、抗旱蛋白的mRNA D、组成抗旱蛋白的氨基酸
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12、Ashby培养基是一种常用的培养基，其基本配方如下表所示，下列有关Ashby培养基的叙述错误的是（ ）
成分
甘露醇
蒸馏水
琼脂
含量
10g
0.2g
0.2g
0.2g
5g
1000mL
适量
A、可用于筛选具有固氮能力的菌株 B、可用于观察目的菌株的菌落形态 C、适合对菌株进行大规模富集培养 D、碳酸钙可以防止培养基过度酸化 -
13、广东有丰富的水果资源用于制作果酒果醋，以下有关利用岭南佳果荔枝制作果酒果醋的叙述正确的是（ ）A、酵母菌无氧呼吸产生酒精是导致后期发酵液pH下降的主因 B、制作果醋时，醋酸菌可在氧气充足时将酒精转化为醋酸 C、制作果酒时，果酒变酸的原因是密封不严导致乳酸菌大量繁殖 D、主发酵阶段完成酵母菌繁殖，后发酵阶段完成糖的分解和代谢
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14、海水立体养殖是海洋养殖业发展的新方向。在基海水立体养殖的深海网箱中，表层养殖海带等大型藻类，中层养殖以细小浮游植物、有机碎屑等为食的牡蛎、扇贝和以小鱼、贝类、有机碎屑为食的黑鲪、六线鱼，底层养殖以底栖藻类、生物遗体残骸、有机碎屑为食的海参。深海网箱中各营养级的能量流动图解如下图所示，M，N表示营养级，各数值代表能量值（单位为K/m2·a）。
(1)、深海网箱中养殖的扇贝可属于生态系统的（填生态系统的组成成分）。图中流经整个生态系统的总能量为KJ/m2·a，由M到N的能量传递效率为%（保留一位小数）。M、N营养级生物的摄食量中均有一部分未被同化的能量，这部分能量的最终去向是。(2)、在用标记重捕法调查黑鳃的种群密度时，由于被标记的鱼受到惊吓后重捕的概率降低，可能会导致估算的种群密度比实际（填“偏大”或“偏小”）。该深海网箱养殖需要不断进行物质投入，原因是。(3)、海水立体养殖是立体农业的一种生产模式，它充分利用群落的进行立体养殖。在构建海水立体养殖生态系统时，需考虑所养殖生物的环境容纳量、种间关系等因素，从而确立每种生物之间的合适比例，这样做的目的是。 -
15、在碳循环过程中，地球系统存储碳的载体称为碳库，森林土壤碳库在全球气候调控和碳平衡维持方面具有至关重要的作用。作为碎屑食物网的起点，土壤微食物网是森林生态系统地上—地下碳转化的关键驱动者。下图是土壤部分生物微食物网及碳库转化的主要途径。
(1)、土壤微食物网中含碎屑食物链（以有机碎屑为第一营养级，以碎屑为食的腐生细菌和真菌也占营养级）和捕食食物链，请写出上图食物网中捕食食物链 ， 土壤微食物网中第三营养级的生物有 ， 短时间内若食菌线虫大量减少，根食性线虫数量会。(2)、在碳循环中，上图e为途径。为了缓解温室效应，我国据出碳中和目标，若要达到此目标，上图要满足关系（用a~e表示）。(3)、土壤碳库转化伴随着能量流动，能量流动是指。 -
16、某自然保护区气候属于半湿润性气候，冬季寒冷，夏季湿润凉爽。森林类型包括落叶松林、白桦-落叶松林和白桦次生林。白桦次生林为原有植被受人类或自然因素干扰后形成的。(1)、林分是指特征大体一致但与邻近地段有明显区别的林子，调查每种类型林分中灌木优势种通常采用法。每种类型林分中的底部土壤中生活着大量小动物，采集这些小动物常用的方法是。(2)、由于乔木层优势种不同，形成了不同的郁闭度（郁闭度是指林冠层遮蔽地面的程度） ，致使林下小环境产生较大差异，林下植被发生变化。研究者对 3种林分乔木层特征进行了比较（图 1） ，并对灌木层的四类植物重要值进行了统计（图 2） ，重要值（%）是植物在群落中的综合数量指标，体现植物在群落中的地位和作用。
①研究发现，落叶松林以落叶松为优势种，其物种多样性较低，据图 1 分析其原因是。
②结合图 1、图 2分析，白桦次生林中灌木层优势种不同于其他林分的原因是。
(3)、白桦次生林的产生是演替的结果，调查发现乔木层和灌木层的丰富度均表现为白桦-落叶松林>落叶松林>白桦林，请结合上述研究结果，阐述白桦-落叶松林丰富度最高的原因是。 -
17、Ca2+、Na+等离子在神经调节过程中具有重要作用。某突触小体可分泌抑制性神经递质 GABA 和兴奋性神经递质 Ach，已知Ca2+浓度增加，可促进神经递质的释放， Ca2+通道受到 GABA的调节（图 1） 。TRPV1 受体对辣椒素和热刺激等敏感，是位于疼痛感神经末梢的一种非选择性阳离子通道，当TRPV1 受体被激活时，能引起Ca2+、 Na+等阳离子内流，使神经细胞产生兴奋，进而产生疼痛感（图 2）。
(1)、图 1 突触小体释放的 GABA能引起突触后膜电位变化，其机理是：当GABA与受体结合后，使（填“阳”或“阴”）离子通道（填“开启”或“关闭”），抑制突触后膜兴奋。(2)、科研人员连续刺激图1所示的神经元，刺激几次之后，测定突触间隙中的Ach明显减少。试推测其原因是。(3)、某镇痛剂的作用机理是：当其与神经元上的受体结合后，抑制Ca2+内流、促进K+外流。其中，抑制Ca2+内流可以 ， 促进K+外流可以 ， 起到镇痛作用。(4)、食用较多辣椒会引起人体产热增多，出现大量出汗的现象。请写出引起大量出汗的神经反射通路。 -
18、下丘脑在体温、血糖、水盐平衡的调节中都有重要作用。下丘脑参与人体相应活动的调节过程如图所示。
(1)、据图分析，激素c为；靶细胞A为 ， 靶细胞C为。(2)、若信号刺激为 ， 则激素b分泌增多，使细胞代谢活动增强以增加产热；同时有关神经兴奋，引起 ， 散热量也相应减少；还可以通过增加衣物、使用空调等性调节来维持体温相对稳定。(3)、已知链脲佐菌素（STZ）可抑制大脑皮层中神经元的胰岛素受体活性，进而导致某种神经退行性疾病，患者随着年龄增长，认知功能下降、记忆力丧失。与正常个体相比，该患者的血糖浓度 ， 且STZ可能会抑制机体脑内的建立。(4)、请利用生长发育状况相同的发热家兔、生理盐水、溶解于生理盐水的赖氨匹林等实验材料，采用灌胃的方法设计实验验证赖氨匹林是通过影响下丘脑体温调节中枢而使机体退热。请写出实验设计思路并预期实验结果：。 -
19、“淀粉—平衡石假说”是被普遍承认的一种解释重力对植物生长调节的机制。植物对重力的感受是通过体内一类富含“淀粉体”的细胞(平衡石细胞)实现的，当重力方向发生改变时，平衡石中的“淀粉体”就会沿着重力方向沉降，引起植物体内一系列信号分子的改变，从而造成重力对植物生长的影响，下列说法正确的是（ ）A、“淀粉体”能将重力信号转化为影响生长素运输方向的信号 B、“淀粉体”的沉降方向和生长素运输的方向相反 C、茎背地生长是因为平衡石细胞向地一侧生长素分布多，细胞生长快 D、根向地生长是因为平衡石细胞使向地一侧生长素分布少，细胞生长慢
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20、原发性甲减是由于甲状腺本身病变引起的甲状腺激素分泌减少，继发性甲减主要指由于下丘脑或垂体病变引起的甲状腺激素分泌减少。为了初步诊断甲、乙、丙三人甲减的原因，做了如下实验：分别给甲、乙、丙三人及一健康人注射适量且等量的TRH，并在注射前30min和注射后30min时分别测量四人血液中TSH的相对含量，结果如下表。下列说法正确的是（ ）
健康人
甲
乙
丙
TSH相对含量
注射前
8
1
0.5
20
注射后
30
30
0.5
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A、甲和丙患有继发性甲减，乙患有原发性甲减 B、注射了TRH后，甲和乙体内甲状腺激素的含量不变 C、三个患者中，可以注射TSH进行治疗的患者是甲和乙 D、下丘脑、垂体和甲状腺之间存在分层调控