2023年高考生物新课标卷真题变式·分层精准练：第6题
试卷更新日期：2023-06-13 类型：二轮复习
一、原题
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1. 某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ）
A、质粒和目的基因都用酶3切割，用E coli DNA连接酶连接 B、质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C、质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D、质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E coli DNA连接酶连接二、基础
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2. 下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（ ）A、天然质粒能直接作为载体 B、限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成 C、不同限制酶切割DNA分子后产生的黏性末端不同 D、DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上3. 如图是DNA分子结构的示意图，其中，基因工程中使用的限制酶的作用位点是（ ）
A、① B、② C、③ D、④4. 用限制酶XbaⅠ和SacⅠ(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用如图中的Ti质粒是（ ）注：图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点。
A、
B、
C、
D、
5. 下列有关E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用的叙述，正确的是（ ）A、T4 DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来 B、E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段平末端之间进行连接 C、T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端 D、E.coli DNA连接酶连接平末端的效率比较低6. 如图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是（ ）
A、a与d可以用不同的限制性核酸内切酶进行切割 B、b能识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开 C、c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对 D、b代表的是限制性核酸内切酶，c代表的是DNA聚合酶7. 下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是（ ）A、用限制酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个 B、限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大 C、-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制性核酸内切酶切出的黏性末端碱基数不同 D、只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒8. 下列关于限制性核酸内切酶的叙述错误的是（ ）A、绝大多数的限制酶由原核细胞中获取 B、每一种限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列 C、限制酶的作用位点是相邻核苷酸之间的磷酸氢键 D、不同酶切割不同的DNA分子可产生相同的黏性末端9. 如图表示BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶的识别序列及其切割位点，下列说法正确的是（ ）
A、这两种限制酶切割DNA分子后形成的黏性末端不同 B、这两种限制酶切割获取目的基因时都会破坏2个磷酸二酯键 C、能被BamHⅠ切割的DNA分子，也一定能被Sau3AⅠ切割 D、能被Sau3AⅠ切割的DNA分子，也一定能被BamHⅠ切割10. 如图所示的黏性末端是由几种限制酶作用产生的（ ）
A、1种 B、2种 C、3种 D、4种11. 限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为
和
。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒，下列相关叙述正确的是（ ） A、酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素 B、目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAG C、分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒 D、经两种酶处理得到的重组质粒能再被这两种酶所识别12. 有关基因工程中工具的说法，正确的是（ ）A、限制酶只能识别6个核苷酸组成的序列 B、限制酶与DNA聚合酶的作用部位一样 C、病毒不能作为基因工程的载体 D、DNA连接酶能把黏性末端的氢键连接起来13. 如图所示，下列有关工具酶功能的叙述，错误的是（ ）
A、限制性内切核酸酶可以切断a处 B、DNA聚合酶可以连接a处 C、解旋酶可以使b处解开 D、DNA连接酶可以连接c处14. 某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。结合图形分析下列有关这一过程的叙述，正确的是（ ）
A、获取基因a的限制酶的作用部位是图中的① B、基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶、质粒 C、连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的② D、一种限制酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子15. 下列有关基因工程的叙述正确的是（ ）。A、限制酶只存在于原核生物中，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列 B、只有同种限制酶切割的末端才能连接，不同限制酶切割的末端不能连接 C、基因工程中，只能利用天然质粒，质粒上的标记基因用于重组DNA的筛选 D、质粒是独立于拟核DNA和真核细胞核之外的环状双链DNA16. 基因S与作物甜度相关，可用于培育转S基因作物新品系。如下图，为使S基因按正确方向与质粒连接，选用的限制酶组合是（）
A、XbaⅠ和SalⅠ B、EcoRⅠ和HindⅢ C、BamHⅠ和HindⅢ D、XbaⅠ和HindⅢ三、提高
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17. 如图表示构建基因表达载体所用的质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是
， 限制酶Ⅱ的识别序列和切点是
。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A、使用限制酶Ⅰ、Ⅱ切割可以防止目的基因自身环化 B、限制酶Ⅱ可以切割两种标记基因，所以没有特异性 C、可以用限制酶Ⅱ切割质粒、限制酶Ⅰ切割目的基因 D、将目的基因插入到四环素抗性基因内完成构建18. 某科研小组利用质粒(图甲)和目的基因(图乙)构建重组DNA。下列分析错误的是（ ）
A、用限制酶HindⅢ和PstⅠ切割质粒，可得到2条DNA片段 B、不能用AluⅠ酶切割质粒和外源DNA的原因是AluⅠ酶会破坏目的基因 C、构建重组DNA时，需选择SmaⅠ酶和PstⅠ酶同时切割质粒和外源DNA D、导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长，而不能在含氯霉素的培养基上生长19. 研究人员用EcoRI和Smal两种限制酶处理某DNA分子，图1为EcoRI切割该DNA分子后的结果；图2是酶切后的凝胶电泳图谱，其中1号泳道是DNA Marker，2号、3号、4号分别是EcoRI单独处理、Smal单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ）
A、据图1可知EcoRI的识别序列为—GAATTC—，切割位点在G和A之间 B、据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在B端，且连着电泳槽的负极 C、据图2可知该DNA分子最可能是含1000个碱基对的环状DNA D、据图2可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个20. 像BclⅠ（-T↓GATCA-）、BglⅡ（-A↓GATCT-）、MboⅠ（-↓GATC-）这样，识别序列不同、，但能产生相同的黏性末端的一类限制酶被称为同尾酶。如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。选用不同的限制酶对质粒和目的基因进行切割，并用DNA连接酶进行连接。下列分析错误的是（ ）
选项
切割质粒
切割目的基因
结果分析
A
BclI和BglⅡ
BclI和BglⅡ
形成的重组质粒的碱基排列顺序不一定相同
B
BclI和BglⅡ
MboI
切割后的质粒不可自我环化，切割后的目的基因可以自我环化
C
MboI
BclI和BglⅡ
形成的重组质粒可被MboI再次切开，但可能无法被BclI和BglⅡ再次切开
D
MboI
MboI
切割后的质粒可以自我环化，切割后的目的基因也可以自我环化
A、A B、B C、C D、D21. 下图为不同限制性核酸内切膀识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（ ）
A、图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 B、若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高 C、酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 D、用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
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