浙科版生物学2023年二轮复习专题强化训练：15基因工程及生物技术的安全与伦理
试卷更新日期：2023-01-06 类型：二轮复习
一、单选题
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1. 将某种海鱼的抗冻基因导入西红柿细胞中，培育成耐低温的西红柿新品种，这种导入外源基因的方法属于（ ）A、杂交育种 B、转基因技术 C、单倍体育种 D、多倍体育种2. 从目前来看，下列哪一生物科技成果运用到了基因工程技术（ ）A、利用酵母菌生产人的胰岛素 B、单克隆抗体技术 C、设计试管婴儿技术 D、微型繁殖和作物脱毒3. T4DNA连接酶可将任意2个具有相同粘性末端的DNA片段连接在一起。该反应过程需消耗ATP，其水解产生的腺苷一磷酸（AMP）通过共价键与酶相连，随后AMP转移至DNA片段，进而完成连接反应。下列叙述正确的是（ ）A、T4DNA连接酶的底物种类较多，故其无专一性 B、T4DNA连接酶催化反应后，其组成成分已改变 C、ATP在该反应过程中可能打开两个高能磷酸键 D、T4DNA连接酶需保存于最适温度和pH条件下4. 将乳酸菌的乳酸脱氢酶基因导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的转基因酵母菌。下列相关叙述正确的是（ ）
A、使用限制酶BamHI处理将乳酸脱氢酶基因插入质粒 B、在含有尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌 C、用LB固体平面培养基培养酵母菌，培养时需倒置 D、一定的发酵条件下，加入离子交换树脂可使乳酸及时脱离发酵液5. 为确定某染色体上是否含有目标基因，进行了如图所示的实验，图中的DNA片段甲，是利用放射性同位素32P标记的脱氧腺苷三磷酸（dATP，dA-Pα-Pβ~Pγ）等材料制备的单链。下列叙述正确的是（ ）
A、制备DNA片段甲时，所用dATP的γ位磷酸基团中的磷必须是32P B、混合时，染色体样品中的DNA分子需始终保持规则的双螺旋结构 C、漂洗的目的是为了去除未和目标基因杂交的 DNA片段甲 D、图示检测过程，运用了抗原-抗体杂交技术6. 应用基因重组技术生产的促红细胞生成素（EPO）能促进红细胞的生成，临床上常用于治疗慢性肾功能衰竭导致的贫血症，作用机理图如下。下列叙述正确的是（ ）
A、在治疗时，可以通过口服或注射的方式给药 B、肾脏感知氧分压下降，引起EPO分泌增加的过程属于反射 C、在应用基因重组技术生产EPO时，常以肾脏细胞为受体细胞 D、运动员违规使用EPO能暂时提高运动成绩，也会增加血液粘稠度7. 大肠杆菌质粒DNA是基因工程的常用载体，其结构如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A、①②③共同组成胞嘧啶核糖核苷酸 B、质粒的碱基含量遵循卡伽夫法则 C、质粒分子中有2个游离的磷酸基团 D、限制性核酸内切酶破坏化学键④8. 将山核桃miRNA169基因转入到拟南芥中，可促进拟南芥提前开花，部分流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A、过程①通常需要RNA聚合酶催化 B、过程②中可利用PCR技术筛选并扩增出目的基因 C、过程③中转化农杆菌一般需要大肠杆菌质粒作为表达载体 D、过程④收获转化的种子需经植物组织培养才获得提前开花的植株9. 研究人员将新霉素抗性基因（Neor）和绿色荧光蛋白（GFP）基因的双标记选择载体导入胎牛输卵管上皮细胞，获得转基因细胞株，并以转基因细胞为核供体，获得转基因牛。下列相关叙述正确的是（ ）A、Neor基因和GFP基因的连接不需要限制性核酸内切酶 B、转基因细胞株的培养液中含新霉素、葡萄糖、氨基酸、激素等物质 C、核移植前应增加转基因细胞培养液中的血清浓度以提高动物克隆成功率 D、观察早期胚胎的荧光筛选胚胎进行移植，移植时不能移植多个胚胎10. 下图为不同限制性核酸内切酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（ ）
A、若DNA上的碱基随机排列，理论上每4096个碱基对会有一个BamH I限制性核酸内切酶的切割位点 B、若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶低 C、作为基因工程的通用载体，质粒上通常会有多种限制性核酸内切酶位点 D、BamH I限制性核酸内切酶切割的DNA无法连接到用Bgl II切割的载体DNA中11. 植物基因工程可以改造农作物性状，使农作物变得更加高产。如图是培育良种水稻的有关原理和步骤，有关叙述错误的是（ ）
A、图中表达载体中的T-DNA插入外源基因后将失去作用 B、图中②过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌 C、需要用除草剂检测转基因植株是否具有抗除草剂性状 D、该过程需要用到固体和液体培养基12. 研究人员通过将生长激素基因导入大肠杆菌内来表达人生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，目的基因要插入到B基因中，大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述错误的是（ ）A、为提高重组成功率常用两种限制酶同时酶切质粒和生长激素基因 B、重组质粒可通过农杆菌介导导入大肠杆菌细胞内 C、上述过程中生长激素基因通常通过逆转录法获得 D、符合生产要求的工程菌可在含链霉素的培养基中生长13. 若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，其原因不包括（ ）
A、目的基因无法插入受体细胞DNA B、目的基因无法复制 C、目的基因无转录所需的启动部位 D、目的基因与受体细胞遗传信息传递方式不同14. 基因编辑是指将外源DNA片段导入到细胞染色体特定位点或删除基因内部的片段，定点改造基因，获得预期的生物体基因序列发生遗传改变的技术。下图是对某生物B 基因进行编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，下列叙述正确的是（ ）
A、sgRNA是合成Cas9酶的模板 B、sgRNA的碱基序列与靶基因碱基序列能够全部互补 C、核酸内切酶Cas9可在特定切割位点断裂核苷酸之叫的磷酸二酯键 D、B基因被编辑后因不能转录而无法表达相关蛋白质15. 现代生物技术广泛的应用于各个领域，对人类的生活产生很大的影响，下列关于现代生物技术的叙述，错误的是（ ）A、转基因技术能解决传统育种的远缘亲本难以杂交的问题 B、由于植物细胞具有全能性，不同种类的植物和同一植物的不同基因型个体的全能性的表达程度相同 C、克隆多莉时，形成的重组卵细胞进行的第一次分裂有DNA的复制，但是转录并未开始 D、原肠胚的中胚层是外胚层的部分细胞分裂后进入内、外胚层之间形成的16. 与常规武器相比，生物武器具有的特点是（ ）①传染性强
②污染面积广，不易被发现
③有一定的潜伏期
④像核武器一样破坏建筑物
⑤自然条件下的大雪、低温、干燥、日晒等不影响生物武器的杀伤力．
A、①②③ B、②③④⑤ C、①②③④⑤ D、①②③④17. 下列属于克隆的是（ ）①将表达载体在受体细胞中进行扩增
②由一个细胞经过有丝分裂形成细胞群
③运用体细胞核移植技术和胚胎分割技术产生的动物
④由一个细菌分裂出多个和它完全一样的细菌而形成菌落．
A、①②③ B、①③④ C、②③④ D、①②③④18. 下列属于克隆的是（ ）①扦插 ②DNA复制 ③胚胎细胞移植 ④精、卵受精作用．
A、①② B、②③ C、①②③ D、①③④19. 转基因抗虫棉在我国的种植面积已占全国棉花种植面积的90%。研究者利用PCR技术检测杂草中有无转基因成分，得到如下图所示结果。相关分析错误的是（ ）
A、空白实验是未加入DNA模板得到的电泳结果 B、推测棉田杂草6、7与抗虫棉的亲缘关系较近 C、结果说明校园杂草与棉花间一定存在生殖隔离 D、转基因成分进入杂草体内可能会引发生态问题20. 草甘膦是一种可以杀灭多种植物（包括农作物）的除草剂。其杀灭植物的原理是能够破坏植物叶绿体中的EPSPS合成酶。通过转基因的方法，让农作物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不被草甘膦杀死。下列有关抗草甘膦转基因大豆培育的分析，错误的是（ ）A、可通过喷洒草甘膦来检验转基因大豆是否培育成功 B、可以用质粒将EPSPS合成酶基因送入受体细胞 C、可以用大豆的受精卵或体细胞作为受体细胞 D、抗草甘膦转基因大豆食品都是不安全的21. 科学家将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，结果它的最适温度提高了10~12℃。下列说法正确的是（ ）。A、蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异 B、对葡萄糖异构酶的改造需要以基因工程为基础 C、蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体作为工具 D、经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传22. 转基因成果令人叹为观止，下列成果属于基因工程技术的是（ ）。A、番茄－马铃薯新物种 B、高产的青霉素菌株 C、将玉米细胞内的叶绿体移入菟丝子细胞内 D、能进行生物固氮的酵母菌品种23. W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某学习小组利用膀胱生物反应器制备W的过程如下图，下列有关说法不正确的是（ ）
A、步骤①构建的重组表达载体上应有供重组DNA的鉴定和选择的标记基因 B、步骤②可以使用显微注射技术 C、膀胱生物反应器与乳腺生物反应器相比具有不受年龄和性别限制等优点 D、W基因只在转基因动物膀胱细胞中存在并表达24. 基因工程产物不可能存在的安全性问题是（ ）A、三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼杂交可能导致自然种群淘汰 B、转基因生物释放到环境中，可能会对生物多样性构成威胁 C、目的基因（如抗虫基因）本身编码的产物可能会对人体产生毒性 D、标记基因（如抗生素抗性基因）可能指导合成有利于抗性进化的产物25. 转基因技术自20世纪70年代兴起以来，取得了突飞猛进的发展，在医药卫生、农牧业、食品工业、环境保护等实际应用领域展示出美好前景，日益受到人们的关注。下列叙述正确的是（ ）A、通过转基因技术人类可以任意改造生物 B、转基因食品对人类的健康没有影响 C、转基因生物一定不会威胁当地物种的多样性 D、转基因生物培育的核心技术是DNA重组技术26. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ）A、若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定 B、抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关 C、抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA D、已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置27. 现有两个物种甲、乙（均为二倍体纯种），其中甲种植株的光合作用能力高于乙种植株，但乙种植株很适宜在盐碱地种植。要利用甲、乙两种植株各自优势，培育出高产、耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段中不可行的是 （ ）
A、利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株 B、将乙种植株耐盐基因导入到甲种植株的受精卵中，可培育出目的植株 C、两种植株杂交后，得到F1再利用单倍体育种技术可较快获得纯种的目的植株 D、诱导两种植株的花粉融合并培育成幼苗，幼苗用秋水仙素处理，可培育出目的植株28. PCR技术扩增DNA片段，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列说法正确的是（ ）
A、从理论上推测，第一轮循环产物中就能得到含引物对的DNA片段 B、至少完成两轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 C、三个循环后可得到5种长度的DNA片段 D、30次循环后，所有的DNA单链上都有引物29. “DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是( )A、取制备好的鸡血细胞液5～10 mL，注入烧杯中，迅速加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min，可使血细胞破裂，释放出DNA B、整个DNA提取过程中，两次加蒸馏水的目的，都是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，析出DNA分子 C、整个DNA提取操作中，两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中 D、DNA鉴定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色30. 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是（ ）
A、目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B、目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C、质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D、质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割二、综合题
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31. 基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的，正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程。20世纪70年代以后，基因工程飞速发展，其被称为生物科学的核心技术，然而生物技术的安全性问题也引起了广泛讨论。请回答下列问题：(1)、霍拉纳（H．G．Khonma）用实验证实了尼伦伯格提出的遗传密码的存在，这些成果不仅使人们认识到自然界中从微生物到人类 ， 而且为基因的分离和合成等提供了理论依据。钱嘉韵是我国台湾的科学家，她是第一个报道分离耐高温DNA聚合酶工作的，“西特斯”公司的工作人员按照钱嘉韵等人发明的操作步骤，成功地分离了这种DNA聚合酶，该酶的发现为基因工程中技术的发明提供了前提。(2)、DNA分子杂交技术也是基因工程的主要技术之一。检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可以采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用等作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出 ， 就表明目的基因已插入染色体DNA中。(3)、目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等重要医药产品。在用转基因动物生产药用蛋白时，需要先将药用蛋白基因与乳腺蛋A基因的等调控组件重组在一起，通过等方法，导入哺乳动物的受精卵中。(4)、部分公众认为转基因农作物可能会对生物多样性构成威胁，根据所学的生物学知识，列举两个理由，减轻或消除他们的担忧：。32. 黄金大米是一种新型转基因大米，其β-胡萝卜素含量是普通大米的23倍，因大米在抛光后呈黄色而得名。八氢番茄红素合酶（其基因用psy表示）和胡萝卜素脱饱和酶（其基因用crtI表示）参与β-胡萝卜素的合成。pmi 为磷酸甘露醇异构酶基因，它编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长。科学家将psy和crtI基因转入水稻，使水稻胚乳中含有β-胡萝卜素，由此生产出的大米称为“黄金大米”。(1)、科学家在培育“黄金大米”时，将psy和crtI基因导入含pmi基因的质粒中，构建了质粒pSYN12424。基因表达载体都含有标记基因，其作用是。该项研究的标记基因是。(2)、在PCR技术中，引物的作用是 ， 若用PCR技术扩增psy或crtI基因，需要在PCR扩增仪中加入种引物。psy基因和crtI基因进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为。(3)、在构建质粒载体时，目的基因的内部（不包括两端）能否含有用到的限制酶识别序列? ， 原因是。(4)、我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大米加工制成的麦芽糖，标注为“本产品加工原料中含有转基因大米，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是。33. 抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）在人体中主要由肝脏合成，是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子。研究者将人的抗凝血酶Ⅲ基因导入奶山羊细胞，获得乳汁中含有大量重组人的抗凝血酶Ⅲ的转基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白广泛存在于哺乳动物的乳汁中。回答下列问题：(1)、抗凝血酶Ⅲ基因的获得与表达载体的构建：从人的中获得抗凝血酶Ⅲ基因的mRNA，逆转录成cDNA，并利用技术进行扩增。为顺利将抗凝血酶Ⅲ基因连接到奶山羊β-酪蛋白基因表达载体上，在设计引物时，应在引物前加入特地选用β-酪蛋白基因表达载体的原因是。与抗凝血酶III基因一起连接到基因表达载体上的还有新霉素抗性基因，该基因的作用是。(2)、山羊成纤维细胞的培养、转化和筛选：取幼龄雌性动物的组织，经处理后获得成纤维细胞悬液，将带有ATⅢ转基因载体的脂质体（由磷脂和胆固醇组成的脂质双分子层所构成的封闭囊泡）与成纤维细胞共培养，获得含有目的基因的受体细胞，该转化方法的原理是。(3)、转基因奶山羊的克隆：将经培养后的转基因细胞取核移入去核卵母细胞中，用处理后进行胚胎体外培养。在移植到的代孕母羊的子宫前，应将早期胚胎培养在的培养液中。代孕母羊怀孕、分娩获得转基因克隆奶山羊。(4)、人的抗凝血酶Ⅲ的分子量大小及含量检测：收集转基因羊的羊奶和正常对照羊奶进行蛋白质凝胶电泳，使不同分子量的蛋白质在凝胶上分开，根据与比较，确定奶中抗凝血酶Ⅲ的分子量大小。利用与人的抗凝血酶Ⅲ进行特异性结合，根据荧光强度判断羊奶中抗凝血酶Ⅲ的含量。若最终获得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地行使其功能，可利用工程进行改造。34. 回答下列（一）、（二）小题：
（一）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。
回答下列问题：
(1)、为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为 ， 并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。取10mL培养液加入90mL无菌水，混匀，静置后取上清液并稀释，将0.1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每毫升样液中微生物数量为个。此外，选育优良菌株的方法还有等。(2)、基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是。(3)、研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中可能是高密度培养的限制因素。(4)、菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌。(5)、（二）如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：
图中B过程是 ， cDNA文库（填“大于”“等于”或者“小于”）基因组文库。
(6)、为在短时间内大量获得目的基因，可用扩增的方法，此方法中的每次循环可分为延伸、退火三个步骤。(7)、目的基因获取之后，需要进行 ， 此步骤是基因工程的核心。(8)、将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是 ， 检测此基因在植物中是否表达成功，可以用技术进行检测。(9)、如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性需要对现有蛋白质进行改造，这要通过被称为第二代基因工程的蛋白质工程。首先要设计预期的蛋白质结构，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的。35. 回答下列（一）、（二）小题：(1)、（一）紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，是目前最好的天然抗癌药物之一。最初的紫杉醇都是从红豆杉树皮中提取的，无法满足人们的需求。利用植物组织培养获得紫杉醇的过程如图所示：
取自红豆杉树皮的外植体需要使用75%的酒精和消毒处理，才能接种到培养基。用纤维素酶和果胶酶除去愈伤组织的细胞壁获取的过程中，常常在 （较高/较低）渗透压的溶液中进行。
(2)、植物培养基中最常用的糖类是蔗糖，蔗糖除了作为碳源和能源外，还具有的作用。(3)、外植体经诱导形成愈伤组织，并由愈伤组织培养阶段转入细胞悬浮培养阶段，细胞悬浮培养时振荡的意义是。(4)、如果将外源基因导入红豆杉进行遗传改造，下图表示构建重组DNA的过程示意图，载体质粒PO具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr），回答下列问题：
图中酶1和酶3分别是、。获得的重组质粒通常通过法导入愈伤组织。
(5)、（二）新型冠状病毒是一种具有很强传染能力的RNA病毒。快速、准确地检测新型冠状病毒对病情的确诊和疫情的防控尤为重要，疫苗及药物的研制等都离不开生物技术与工程的支持。 新冠核酸检测采用实时荧光PCR技术：通过咽拭子采集的样本转移至含病毒保存液的采样管中。病毒RNA需要经过酶作用生产cDNA，才能作为PCR的模板。(6)、效应细胞毒性T细胞能识别被感染细胞表面的 。阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染，可能产生假阴性的因素有 。a.取样太早，样本中病毒量少，达不到实时荧光PCR检测阈值
b.样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解
c.病毒发生变异
(7)、利用技术将骨髓瘤细胞和细胞相互融合形成细胞，此细胞生产的抗新冠病毒的单克隆抗体，不仅可以用于对患者的治疗，还能作为特异探针，利用技术对高风险人群进行检测。三、实验探究题
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36. 现阶段新冠病毒抗原检测试剂盒开始广泛投入使用，各地区也在广泛进行核酸检测。为了探究这两种检测方式的准确性（结果以阳性比例为指标）随感染天数的变化规律，进行了以下实验。(1)、实验思路：选取健康未感染过新冠病毒的小鼠100只，分别标号1-100；并同时进行病毒感染处理，然后 ， 计算小鼠的抗原检测阳性和核酸检测阳性比例。(2)、实验分析：
①该实验选取数量较多的小鼠进行实验目的是。
②原理分析：
抗原检测（原理见上图）往往是通过鼻拭子采集细胞及粘液样本，在缓冲液里进行处理，释放出各种物质，然后加入样品槽中，与样品槽中的新冠病毒蛋白单抗混合后，利用法进行分离，从而确定是否为抗原阳性。
核酸检测往往是通过咽拭子采集细胞及粘液样本，经一定的处理后得到病毒遗传物质，然后经过扩增，通过检测产物量（与荧光强度呈正比）来确定是否为核酸阳性。
③结果分析：
若抗原检测阳性，则会在线上出现阳性标记，而无效检测会在T线和C线上都不出现阳性标记。
实验结果发现核酸检测阳性结果的出现早于抗原检测，且核酸检测阳性的小鼠比例都高于抗原检测阳性比例，可能的原因是。
(3)、实际应用：与核酸检测相比，抗原检测虽然不够灵敏，但是有的优点；实际使用中发现，若人体感染了其他病毒，不会造成抗原检测假阳性，原因是；若某个人从中风险地区回家后，自行进行抗原检测，结果呈阴性，但是防疫部门仍建议居家隔离一段时间，原因是。
37. 回答下列（1）、（2）小题：(1)、苹果醋是一种酸性发酵健身饮料，含有丰富的维生素、无机盐、氨基酸和有机酸类，风味独特，深受广大消费者欢迎。在苹果醋生产中，醋酸菌的性能对产品质量、发酵效率有很大影响。研究者为了从醋酸菌中选出优势高产的菌种，做了相关实验，部分实验结果如下所示。醋酸菌因产生醋酸溶解了培养基中的碳酸钙，而使菌落周围产生透明圈。回答下列问题：
①菌株培养过程中需要对各种用具进行灭菌，置于超净台上的用具可利用灭菌30分钟。菌株编号
透明圈直径（mm）
菌落直径（mm）
A1
3.5
1.5
A2
1.5
0.9
A3
7.2
1.8
A4
6.5
3.2
②依据菌落的（答出2点）等特征筛选出四株可能是优势高产的菌株（A1、A2、A3和A4），并采用法来进一步纯化这些菌株。筛选的菌株接种于斜面培养基后，置于中临时保存。根据表中实验结果，可以选取菌株用于生产。
③用筛选出的高产醋酸菌制作苹果醋，当苹果酸和醋酸等总酸浓度不再增加时，其原因可能是。（答出2点）
④在苹果醋工业生产过程中，除考虑上述条件外，还需温度、pH和等外界因素。(2)、如图为利用转基因小鼠获得人源性抗体的两种途径。回答下列问题：
⑤人体内抗体种类繁多，且抗体基因在细胞内一般成簇存在。获取人抗体基因可从细胞中提取出相应mRNA为模板，利用酶合成；或通过设计引物，利用技术获得。
⑥途径一利用胚胎干细胞作为受体细胞，原因是胚胎干细胞具有特点。为让抗体基因只在嵌合鼠乳汁中表达，可将抗体基因与小鼠乳清酸性蛋白基因的部位结合，构建出乳腺特异性表达载体。
⑦途径二将小鼠抗体基因剔除的目的是 ， 获得的抗体比途径一的抗体具有优点。
38. （一）苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了寻找生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。请回答：
(1)、配制培养基时，培养基的灭菌应该在倒平板（填“之前”或“之后”）。(2)、图中①过程取5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡得到10-1的土壤稀释液，进行系列稀释后，用法接种到培养基上。在接种过程中，下列选项无需用到的是（填序号）。①酒精灯 ②玻璃刮刀 ③显微镜 ④接种环 ⑤移液器
(3)、接种后在37℃条件下培养24小时，根据菌落特征鉴别出芽孢杆菌并进一步纯化。目的菌筛选时，应将芽孢杆菌接种于（填“A”或“B”）处，培养3~5天，筛选出抑菌率最高的菌株。(4)、与化学防治相比，该生物防治方法的优势是。（只需答出一点）(5)、（二）干燥综合征（SS）是一种自身免疫病，其血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。科研人员为生产SSB抗体的检测试剂，利用基因工程获得重组SSB蛋白，流程如下，请回答：
利用RNA通过①过程获得cDNA需要酶。通过PCR技术扩增SSB基因的前提是要有 ， 以便合成引物。为与PET41a质粒连接，获得的目的基因A两端要含有 ， 酶切位点。
(6)、获得含SSB基因的重组质粒后，进行如下实验切割原质粒和重组质粒，获得片段大小如表（1kb=1000碱基对），分析数据，计算可得SSB基因的长度为。与人基因组文库中的SSB基因相比，通过①过程获得的SSB基因结构特点是。限制酶
EcoRI
BamHI和XhoI
原质粒
8.1kb
2.7kb、5.4kb
重组质粒
3.4kb、5.0kb
未做该处理
(7)、②过程目的是将重组质粒转染到处于的大肠杆菌内，并接种于添加的培养基上，收集菌落进行鉴定，将阳性菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到重组SSB蛋白。39. 回答下列（一）、（二）小题：（一）活性染料应用广泛，但其产生的废水含盐量高、有机质高、色度高，对环境污染严重。研究小组利用活性黄色染料筛选能降解活性染料的微生物菌种，以用于水体污染治理。
(1)、采样：在附近采集活性污泥，加入适量的 ， 通入氧气，促进微生物的以备使用。(2)、菌种筛选：取活性染料配置成500mg/L的培养基分装于5个锥形瓶，经后分别加入1mL的含菌种的污泥，置于中培养一段时间后，选择的锥形瓶中的微生物进一步分离提纯。(3)、纯种分离：配置相应浓度的活性染料固体培养基后，若要操作简便，可利用法筛选得到纯的菌种。(4)、菌种保存：分离得到的菌种可接种到培养基，置于4℃冰箱保存。(5)、（二）2018年非洲猪瘟病毒传至我国并对养猪业构成严重威胁，该病毒是一种双链DNA病毒，可编码多种蛋白质。非洲猪瘟病毒表面的主要结构蛋白p22蛋白，可以诱导猪产生抗体。工业上可利用转基因技术生产p22蛋白疫苗，并制备相应的单克隆抗体。请回答下列有关问题：
p22蛋白疫苗的制备和鉴定。与p22蛋白基因及质粒有关的限制酶切位点如下图所示，已知不同种限制酶切割出的黏性末端不同。
（LacZ基因能表达出β-半乳糖苷酶，使无色的半乳糖苷分解，进而使菌落呈现蓝色）
①根据p22蛋白基因的序列设计一对引物，通过技术扩增特定的DNA以获取目的基因；②构建重组DNA，利用酶（写出酶的名称）分别切割目的基因和质粒，以减少连接产物的种类并避免目的基因与质粒反向连接；③用重组质粒转化感受态细胞，并将受体细胞涂布在含氨苄青霉素的LB固体平板上，在37℃恒温培养箱培养12h，挑取的单菌落，将其转移至液体培养基扩大培养。一段时间后离心收集细胞，超声破碎后离心取上清液制备样品，利用的方法对p22蛋白进行鉴定。
(6)、抗p22蛋白的单克隆抗体制备及鉴定。p22蛋白可作为对小鼠进行多次注射后，分离出小鼠脾细胞，利用的仙台病毒促进该细胞与体外培养的骨髓瘤细胞融合；融合细胞经过多次筛选后得到的杂交瘤细胞具有的特点是；将选出的杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔，待小鼠腹部膨胀明显，采集 ， 分离提取出单克隆抗体。40. 回答下列（一）（二）小题。(1)、（一）有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
实验使用的培养基，含有营养物质和。制备培养基时，应将pH调至。图中继续实验中可能包含的实验操作有、、。
(2)、通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。你认为可能的原因是。(3)、实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是。按图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL细菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕的细菌数为个/cm2。(4)、（二）回答下列有关基因工程的问题：I．研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内，成功获得了抗虫转基因棉花，在一定程度上减少了杀虫剂的使用，减少了环境污染，提高了作物的产量和质量。
提取某细菌总RNA，经逆转录形成互补的DNA（cDNA），再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA，PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程，故反应体系中需加入酶。(5)、常用农杆菌与经后的外植体共培养一段时间完成转化，需先将C基因的cDNA插入到T质粒的T-DNA上并导入农杆菌，有利于。若要检测目的基因是否反向插入，（填“能”或“不能”）根据带标记的目的基因单链作探针的核酸分子杂交结果判断。(6)、Ⅱ．基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割（如图）。请据图回答：
从CRISPR/Cas9系统作用示意图看，能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是。一般来说，在使用基因编辑工具对不同DNA进行编辑时，应使用Cas9和（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因的相关编辑。
(7)、CCR5基因是人体的正常基因，其编码的细胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵辅助性T淋巴细胞的主要辅助受体之一。科研人员依据的部分序列设计sgRNA序列，导入骨髓造血干细胞中，构建sgRNA-Cas9复合体，以实现对CCR5基因的定向切割，变异的CCR5蛋白无法装配到细胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的从而有效减缓病症。41. 细胞表面的B分子（受B基因控制）具有重要作用，研究发现肿瘤细胞B基因不表达或低表达。为验证B基因表达对小鼠前胃癌细胞（MFC）的影响，科研人员利用下列材料和用具进行了实验。材料与用具：MFC悬液、含有B基因的真核细胞表达载体pcDNA3、不含B基因的真核细胞表达载体pcDNA3（空白载体）、动物细胞培养液、卡氏瓶、流式细胞仪（可以测定每个细胞内DNA含量从而确定细胞所处时期）等。
实验思路：
①____。
②体外细胞培养实验：分别将MFC、含有外源B基因的MFC（记作MFCB+）、含有空白载体的MFC（记作MFCB-）等量接种于动物细胞培养基中，一段时间后用流式细胞仪检测三组细胞的细胞周期情况。结果如下表：
组别
G0/G1（%）
S（%）
G2/M（%）
总计（%）
MFC
55.0
31.1
13.9
100.0
MFCB+
66.7
19.6
13.7
100.0
MFCB-
54.7
30.7
14.6
100.0
（备注：G0期为静止期，此时期细胞暂不分裂）
③体内细胞培养实验：将适量的MFC、MFCB+和MFCB-分别接种于去除胸腺的三组小鼠（裸鼠）体内，接种后每天测量计算裸鼠体内肿瘤体积大小，并记录。
回答下列问题：
(1)、完善实验思路：①。(2)、体外细胞培养的实验结论是：。(3)、MFC中是否含有B基因？。购买得到的MFC一般需要先进行处理，再在动物细胞培养基中进行培养。表达载体pcDNA3需要具备相应限制性核酸内切酶识别序列、抗性基因和结合位点，以便于B基因与之形成重组DNA、筛选阳性细胞和在MFCB+中的表达。(4)、体内细胞培养实验使用裸鼠的原因是：。临床上也可以通过检测肿瘤的血流量来反映肿瘤生长速度，从肿瘤代谢角度分析，这种检测的机理是。(5)、预期体内细胞培养实验结果（用曲线图表示）。