浙科版生物学2023年二轮复习专题强化训练：13微生物利用和传统发酵技术
试卷更新日期：2023-01-05 类型：二轮复习
一、单选题
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1. 高压蒸汽灭菌是避免杂菌污染的重要方法。下列常采用该法进行灭菌的是（ ）A、家庭葡萄酒发酵所用的葡萄 B、添加血清的动物细胞培养液 C、含植物生长调节物质的MS培养基 D、用于获得原生质体的酶解液2. 防止杂菌污染和获得纯净微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是（ ）A、将培养基转移到三角瓶和试管中时必须使用三角漏斗 B、接种环在划线前后都要进行灼烧并立即划线以免灭菌失效 C、无菌技术只能用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 D、高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从高压蒸汽灭菌锅开始加热时计时3. 下列关于“泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定”实验的叙述，错误的是（ ）A、用热水冲洗泡菜坛以达到消毒的目的 B、用开水浸泡蔬菜利于胞内营养物流出 C、用蒸馏水冲洗待测泡菜以去除蛋白质 D、用容量瓶进行定容有利于后续的计算4. 培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述，错误的是（ ）A、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境 B、培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定 C、培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求 D、培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等成分5. 下列关于无菌技术的相关叙述，正确的是（ ）A、试管用棉塞封口不能防止培养的目标微生物外漏 B、组培苗锻炼时所用的蛭石和珍珠岩通常不需要高压蒸汽灭菌 C、动物细胞培养液的配制需要过滤灭菌 D、使用后培养基需要高压蒸汽灭菌（0.5kg/cm2压力、121℃）处理6. 下列有关生物技术的原理和技术基础的叙述，错误的是（ ）A、基因工程的理论基础涉及DNA的双螺旋结构和遗传密码的通用性等 B、发酵工程利用微生物在无氧条件下代谢高效的特点，从而大量生产菌体细胞或相关代谢产物 C、体外受精的原理与质膜的信息交流和流动性有关 D、植物克隆的技术基础为植物组织培养7. 涂布分离法可用于微生物的技术，下列叙述正确的是（ ）A、选取具有最少菌落数的稀释倍数进行计数 B、严格厌氧微生物的计数宜采用涂布分离法 C、涂布培养基上的菌落数代表样品中的全部菌数 D、样品中待测菌数量多而稀释倍数太小时计数结果会偏小8. 果酒制作过程中，发酵液中蔗糖、还原糖、乙醇含量以及酵母菌数量随时间变化如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A、表示蔗糖和还原糖含量的曲线分别是甲和乙 B、t1~t2时段，酵母菌细胞呼吸释放的能量绝大部分贮存在ATP中 C、t2~t3时段，酵母菌细胞合成ATP的主要部位是线粒体基质 D、t3~t4时段，酵母菌数量下降的直接原因是蔗糖含量不足9. 近年来，随着养殖业的迅猛发展，会产生大量的羊毛废弃物，这些废弃物中含有大量难以分解的角蛋白。为此，某科研单位从土壤中分离出具有较强羊毛角蛋白降解能力的菌株NJU-05、NJU-07、NJU-10三种，并对其液体发酵条件进行了探究，结果如图1、图2所示（CK为对照组）。下列叙述错误的是（ ）
A、菌种的分离用固体培养基，菌种的扩大培养用液体培养基 B、分离纯化时应挑取较大的菌落，并进行再次分离纯化，获得单菌落 C、从长期堆积羊毛废弃物外采集土壤样品后，进行富集培养，以增加羊毛角蛋白降解菌的数量 D、应选择菌种NJU-10作为降解角蛋白的菌种可获得较好的降解效果，其降解的最适条件为35℃、pH=910. 泡菜是我国许多家庭的必备美食，下列有关泡菜的腌制和亚硝酸盐测定的叙述中，错误的是（ ）A、制作泡菜时用热水短时处理可抑制某些微生物产生果胶酶，改善口感 B、泡菜发酵中期，乳酸菌会大量繁殖，发酵后期，乳酸菌会受到抑制 C、测定泡菜中亚硝酸盐含量时使用的氯化铵缓冲液呈碱性 D、测定时须用等比（或等差）浓度梯度的亚硝酸钠标准液制作标准曲线11. 光电比色法是常用的物质含量检测方法，如可以通过光电比色法测定并计算出泡菜中的亚硝酸盐含量，与国家标准对比分析，确定是否亚硝酸盐超标。下列相关叙述，正确的是（ ）A、测定OD值时，需要往比色杯中加入蒸馏水作空白对照 B、测样品液与标准溶液的OD值时选用的光波长必须相同，光程可以不同 C、从泡菜中溶解出的亚硝酸盐需要进行显色反应，定容后再测定OD值 D、对亚硝酸盐的吸收光谱进行分析，发现550m是亚硝酸盐吸光率最大的光波长12. 下列关于“分离以尿素为氮源的微生物”实验的叙述，正确的是（ ）A、在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌 B、液体培养基振荡培养的目的是使微生物均匀分布以便涂布 C、对含有尿素的培养基进行灭菌时，需降低高压蒸汽灭菌的压力与温度 D、称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板这些操作都需要在酒精灯火焰旁进行13. 下列关于“乙醇发酵实验”的叙述，错误的是（ ）A、干酵母在活化过程中会产生较多气泡 B、发酵前需要充分振荡，使酵母菌和葡萄糖混匀 C、混合液表面加液体石蜡的目的是阻止气体进出 D、发酵时30℃的水浴有利于保证酶较高活性14. 甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动：甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒
乙：植物组织→形成愈伤组织→长芽→生根→试管苗
丙：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品
丁：剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养
据此分析错误的是（ ）
A、甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长 B、乙组常用的培养基是LB半固体培养基 C、丙组泡菜坛中可以加入陈泡菜水，其作用是提供经扩大培养的发酵菌种 D、丁组由原代培养转到传代培养需用胰蛋白酶处理15. 某同学从植物中提取了W物质，并研究其抑菌效果。在平板中央处打孔后加入提取物W，测量抑菌圈的大小和计算抑菌圈平均增幅速率，实验方法和结果如下图所示。下列分析错误的是（ ）
A、将一定量菌液与刚灭菌的培养基混匀后，冷却并倾倒平板可得到试验菌平板 B、在平板上打孔的钢管需要灼烧灭菌，目的是防止微生物污染平板 C、抑菌圈直径的大小与菌体浓度、提取物W的浓度和预扩散时间密切相关 D、在本实验时间内，加入提取物W后的24小时可获得最佳抑菌效果16. 《齐民要术》记载：“世人云：“米过酒甜＇此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列叙述错误的是（ ）A、米过酒甜是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B、酿酒过程起泡现象是微生物厌氧呼吸产生的CO2释放形成的 C、“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止 D、“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH值升高或营养物质含量下降17. 假单胞菌是一种革兰氏阴性杆菌，其产生的天然代谢产物申嗪霉素是一种绿色农药。下列关于假单胞菌的培养错误的是（ ）A、应使用中性偏碱的LB培养基培养假单胞菌 B、用比浊计可对假单胞菌培养液进行活菌计数 C、用G6玻璃砂漏斗抽滤可实现假单胞菌与申嗪霉素的分离 D、假单胞菌培养结束后，培养基应先高压蒸汽灭菌再丢弃18. 下列关于果醋制作的叙述，错误的是（ ）A、不同菌种制得的果醋风味不同 B、可通过振摇法对菌种进行扩大培养 C、流出液pH不再减少说明乙醇氧化停止 D、醋杆菌附着在疏松的锯末后需调pH至7.019. 如图为划线分离法接种的示意图，下列说法正确的是（ ）
A、观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是① B、图中所示的4次划线后，都应将接种环放在酒精灯上灼烧 C、图中所示的4次划线前，都应将接种环放在酒精灯上灼烧 D、图中④区域最可能出现单菌落，①区域不可能出现单菌落20. 下列关于微生物的培养叙述正确的是（ ）A、微生物都可以用LB液体培养基进行扩大培养 B、苹果青霉应该在弱酸性的条件下进行培养 C、微生物的培养基都需要有碳源和氮源 D、用稀释涂布的方法进行细胞计数通常会使计数偏多21. 下列关于无菌操作的叙述，正确的是（ ）A、外植体用次氯酸钠消毒后接种到培养基中 B、动物细胞培养和植物组织培养都需无菌操作 C、在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风 D、在制作果酒和果醋时必须进行无菌操作22. 下列关于原生质体和细胞计数的叙述，错误的是（ ）A、测定植物原生质体的密度时，可用血细胞计数板 B、红墨水不能进入活细胞，可用于检测细胞的存活状态并计数 C、涂布分离法和划线分离法均能得到单菌落，都可用于细胞计数 D、酵母菌在液体培养基中培养一段时间后，可用比浊计测定其密度23. 椰毒假单胞菌是一种耐温性极强的细菌，对人体的肝、肾等器官会造成较大危害，下列相关叙述正确的是（ ）A、可通过在液体培养基中培养获得椰毒假单胞菌的单菌落 B、利用豆芽汁配制的天然培养基是培养椰毒假单胞菌最适宜的培养基 C、培养椰毒假单胞菌时可将接种好的培养皿倒置于4℃冰箱中 D、利用涂布分离法测定椰毒假单胞菌的密度较实际值低24. 下列关于"分离以尿素为氮源的微生物"实验的叙述，错误的是（ ）A、从有哺乳动物排泄物的地方取土样，分离到目的微生物的概率高 B、实验中所用LB固体培养基，与分离大肠杆菌所用LB培养基成分有不同 C、对尿素固体培养基灭菌的方法是G6玻璃砂漏斗过滤 D、在尿素固体培养基生长的微生物不一定都能分泌脲酶25. 下列关于泡菜制作的说法中，正确的是（ ）A、在泡菜制作中，随腌制时间延长，亚硝酸盐含量一直减少 B、制作泡菜时，为缩短发酵时间，可加入已腌制过的泡菜汁 C、热水短时处理蔬菜的目的是破坏细胞膜，从而使成品泡菜口感较脆 D、用光电比色法测定泡菜样品溶液光密度值时，光源最好选用紫红色光26. 下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（ ）A、利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物 B、配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH C、酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒 D、适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化27. 下列有关微生物培养与分离的操作叙述中正确的是（ ）A、G6玻璃砂漏斗用完后用0.1mol/LHCl浸泡，并抽滤去酸 B、在将培养基转移到三角瓶和试管时使用取样器 C、在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风 D、玻璃刮刀在涂布前后都要进行灼烧处理28. 下列关于生物技术实践的叙述，正确的是（ ）A、制作果醋时，通气的直角玻璃管内塞有脱脂棉球，用以过滤空气 B、振荡培养能增大微生物与培养液的接触面积，从而促进微生物对营养物质的吸收 C、测定样品中亚硝酸盐含量时，将水放入比色杯中，直接测其 OD 值，作为空白对照 D、亚硝酸盐可在碱性条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，产物再与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物29. 下图表示细菌细胞中的一个反应程序。在这个程序中，一种氨基酸在酶的作用下产生另一种的氨基酸，1～6代表不同的氨基酸，V～Z代表不同的酶所有氨基酸对生命活动都是必需的。原始种的细菌只要培养基中有氨基酸1就能生长，而细菌的变异种只有在培养基中有氨基酸1、2、5时才能生长。下列叙述正确的是（ ）
A、细菌的变异种缺乏的酶有X、W、Z B、图示各种酶的形成可能会用到高尔基体和内质网的加工 C、若在培养基中加入相应的酶，细菌也可以生存 D、吸收的氨基酸用于合成多肽时，其场所核糖体可以与DNA直接接触30. 细菌内某种物质在酶的作用下转变为另一种物质的过程如图所示，其中甲～戊代表生长必需的不同物质，①～⑤代表不同的酶。野生型细菌只要在培养基中添加甲就能生长，而突变型细菌必须在培养基中添加甲、乙、丁才能生长。下列叙述正确的是（ ）
A、突变型细菌缺乏酶①、②、③ B、酶④与乙结合后不会改变酶④的形状 C、酶②能催化乙转变为丙，也能催化丙转变为丁 D、若丙→戊的反应受阻，突变型细菌也能生长二、综合题
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31. 回答下列（一）（二）小题：
（一）某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌，并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定，以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方，其中溴甲酚绿遇酸变黄。
水
牛肉膏
蛋白胨
酵母膏
番茄汁
葡萄糖
吐温
碳酸钙
溴甲酚绿
100mL
1g
1g
1g
20g
1g
0.05mL
1.7g
0.01g
请回答下列问题：
(1)、配制该培养基，除表中的成分外还需添加2g的；添加碳酸钙除了方便观察是否产酸，还可以产生CO2 ， 以维持培养基的恒定。(2)、初步筛选：应用方法进行分离，挑选出的菌落作为初筛菌，再分别挑取其中形态大小各不相同的菌落进行菌种纯化；最终获得若干个不同的菌种用于后续测定。(3)、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定：光电比色法可用于细菌细胞密度的测定，OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比，通常用于细菌细胞密度（OD600）测量。在无菌条件下将不同菌种分别接种至MRS—NaNO2的培养基中，37℃厌氧培养24h。再将菌液 ， 测定OD600值，OD600值相对较小的菌株生长能力。并通过测定发酵前后亚硝酸盐的含量，可以计算出。（二）面对新冠疫情，最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测，原理为实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测法，技术流程如下图所示，①②③表示相关步骤。请回答：
(4)、PCR技术与DNA体内复制过程相比，两者的复制方式都是。RT—PCR过程中，需先以RNA为模板合成cDNA，故装置中需添加酶。(5)、过程①中，RNA提取裂解液可同时灭活病毒，原因是。采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理，其目的是。步骤③需要的酶是 ， 引物F和引物R是根据序列合成的。(6)、在进行新冠病毒核酸检测时，通常以病毒的ORFlab基因为检测的目标基因，是因为ORF1ab基因具有的特点。检测试剂中还加有“阳性对照”和“阴性对照”，阴性对照的主要作用是.32. 回答下列（一）、（二）小题：（一）石油污染导致海洋生物多样性严重下降，科学家利用生物工程，对自然界存在的能够分解石油的细菌进行改造，从而获得分解石油能力更强的菌种。
(1)、从有石油污染物的地方取得土样，用无菌水制成 ， 采用涂布分离的方法接种在的固体培养基上培养，选择透明圈与菌落比例大的 ， 采用发酵工程扩大培养。为了从爱酵液中分离出菌体细胞通常采用过滤、和沉淀等方法。(2)、为进一步获得分解石油能力更强的细菌，可利用现有菌种，通过、、原生质体融合等技术获得。(3)、如果对菌液中的细菌进行计数，常采用（填“血细胞计数板计数”、“稀释涂布平板法”、“两者均可”）。(4)、短期保存菌种：用划线法将菌种接种在上，经过培养后置于低温环境保存。
（二）回答基因工程、动植物克隆的有关问题：(5)、为获得抗虫棉，需要从芽孢科菌中提取并纯化全部的mRNA，通过特殊方法建立从中选出抗虫基因。然后将抗虫基因整合到Ti质粒的上，然后导入农杆菌，在液体培养基中使农杆菌和植物细胞慢速混合培养，完成转化实验。为筛选含有抗虫基因的植物细胞，可通过和PCR技术进行检测。下列有关PCR技术的叙述，错误的是()A.PCR技术的原理涉及DNA半保留复制、碱基互补配对和DNA热变性等
B.PCR技术扩增目的基因时，以引物和模板链形成的双链区为起点
C.dNTP 为PCR反应过程提供原料和能量
D.PCR技术需要设计两种碱基序列互补的特异引物
(6)、获得再生组培植株主要途径有：一是采用带的茎段为外植体，可直接萌生成一株幼苗，该过程需要适当提高培养基中的浓度以促进丛状苗的形成。二是愈伤组织通过器官发生途径或途径再分化为完整植株。(7)、相对于新冠患者康复后的血清，单克隆抗体的治疗效果更好，原因是单克隆抗体在应用时。33. 回答下列（1）、（2）小题：(1)、回答与产淀粉酶的枯草杆菌育种有关的问题：Ⅰ.为快速分离产淀粉酶的枯草杆菌，可将土样用制成悬液，再将含有悬液的三角瓶置于80℃的中保温一段时间，其目的是。
Ⅱ.为提高筛选效率，可将菌种的过程与菌种的产酶性能测定一起进行：将上述悬液稀释后涂布于淀粉为唯一碳源的固体培养基上培养，采用显色方法，根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产酶及产酶性能。
Ⅲ.为了获得高产淀粉酶的枯草杆菌，可利用现有菌种，通过后再筛选获得，或利用转基因、等技术获得。
(2)、回答与植物转基因和植物克隆有关的问题：Ⅳ.在用农杆菌侵染的方法进行植物转基因过程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生长，二是筛选转化细胞。当选择培养基中抗生素浓度时，通常会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行抗生素的检测。
Ⅴ.为提高培育转基因植株的成功率，植物转基因受体需具有较强的能力和遗传稳定性。对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测，可通过观察细胞内形态是否改变进行判断，也可通过观察分裂期染色体的 ， 分析染色体组型是否改变进行判断。
Ⅵ.植物转基因受体全能性表达程度的高低主要与受体的基因型、培养环境、继代次数和长短等有关。同时也与受体的取材有关，其中受体为时全能性表达能力最高。
34. 回答下列（1）、（2）小题：(1)、研究表明低温发酵可以显著提高果酒的口感，但发酵的速度却过于缓慢。为克服这一缺点，科研人员制备了一种在低温下具有较强发酵能力的固定化酵母菌。请回答以下问题：Ⅰ.为获取具有较强发酵能力的酵母菌，科研人员将普通酵母菌用紫外线照射等方法进行处理，选择在低温条件上能大量繁殖的酵母菌分别接种于等量的葡萄糖培养液中，然后置于低温、条件下培养。一段时间后，取适量发酵液离心，取与相应的显色剂反应后，用光电比色法测定酒精含量，从而选择高活性的菌种制成干酵母。
Ⅱ.在超净工作台中，将耐低温的高活性干酵母置于适宜温度的溶液中，待酵母悬液中出现气泡后，加入包埋介质制备成固定化酵母菌，最后用无菌水清洗以除去。用固定化酵母菌能明显缩短果酒发酵时间的原因是固定化使 ， 形成酵母菌密度较高的发酵环境，从而加快反应速度。
Ⅲ.果酒在醋杆菌的作用下可转为果醋。将果酒、水、醋杆菌等混合液倒入发酵瓶时，不能让发酵瓶中有游离液体存在的主要目的是。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、嗅之外，还可以通过检测作进一步的鉴定。
(2)、下图表示获得抗除草剂转基因玉米的培育过程，图中的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题：
Ⅳ.构建重组质粒是基因工程的核心，此过程通常需要和DNA连接酶等工具酶。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有一段包含报告基因的T－DNA序列，因该片段能进入植物细胞并 ， 从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔定律。
Ⅴ.图中筛选1的目的是。农杆菌转化愈伤组织的过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中加 ， 并挑选的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。
Ⅵ.将单个转化的愈伤组织细胞置于适当的液体培养基中，经过适当配比的诱导，可发育成胚状体，最后发育成完整的植株。此过程始终要在适宜温度、适宜培养基及等条件下进行。
35. 回答下列（1）、（2）小题：(1)、如图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答下列问题：
Ⅰ.绿色荧光蛋白基因在该实验中是基因。图中过程①②形成重组质粒时，需要用到的工具酶是。
Ⅱ.过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多、最有效的技术是。
Ⅲ.依据GFP的特性，该蛋白在生物工程中的应用价值是（填字母）。
A、作为标记蛋白，研究细胞的转移
B、作为标记基因，研究基因的表达
C、注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠
D、标记噬菌体外壳，示踪DNA路径
Ⅳ.重组细胞经过、胚胎培养和后直接由受体诞下转基因克隆猪。为了繁殖更多后代，可以通过技术，产生同卵多仔。
(2)、啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产的简易流程如下：①大麦种子发芽，释放淀粉酶；②加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活；③将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉；④糖化并过滤得麦汁；⑤麦汁蒸煮；⑥加入酵母菌，发酵；⑦过滤，77℃保温30分钟；⑧过滤、分装啤酒进行出售
请回答：
Ⅴ.大麦种子萌发过程中，受细胞分裂素、等激素的影响，后者可促进淀粉酶的形成，便于动员贮藏的养分。
Ⅵ.流程④若利用一定量的麦芽本身所含的酶进行糖化，则影响糖化的主要因素除pH、温度等环境因素外，还有（写出1点即可）。流程⑤麦汁蒸煮的目的除了杀菌外，还能 ， 从而稳定麦汁组分，保证最终产品的质量。流程⑥在加入酵母菌前为避免高温杀死菌种，需将麦汁进行。
Ⅶ.生产过程中需对啤酒酵母进行质量检测，包括出芽率、耐酒精度、细胞数等。检测不同发酵阶段的酵母细胞数可采用的方法有、。为使酵母可长时间连续使用、提高设备利用率、发酵条件易于控制，生产上可以对酵母菌进处理。
Ⅷ.可在相关标准范围内，加入适量的添加剂——单宁、硅胶、鱼胶等，改善啤酒的泡沫、风味和非生物稳定性并使啤酒澄清。此外，可使用提高其澄清度。
三、实验探究题
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36. 回答下列（1）、（2）小题：(1)、原产于亚洲西部的葡萄含有丰富的矿物质、多种维生素和人体所需的氨基酸，具有生津消食、缓解疲劳、补血益气的功效。利用葡萄生产的葡萄果汁、葡萄酒、葡萄醋等因具有独特的口感和丰富的营养而倍受人们喜爱。请回答下列问题。
Ⅰ.在自然界中可以从某些微生物如等中获得果胶酶。在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使
Ⅱ.用如图装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀进行关闭。比色法测定葡萄酒中的酒精含量：首先用和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取等量经脱色处理的葡萄酒，加入 ， 得到样品管，用比色计测得 ， 最后计算得到酒精含量。
Ⅲ.在生产葡萄酒时由于操作不当，发现葡萄酒变酸。在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是
Ⅳ.为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行处理。
(2)、脓毒症的发病与肝素结合蛋白（HBP）的水平相关性显著，研制抗HBP单克隆抗体用于临床HBP定量测定，具有重要的临床应用价值。有关抗HBP单克隆抗体的研发流程如下。Ⅰ.用对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
Ⅱ.无菌取小鼠脾脏，提取脾细胞后可使用效率很高的技术使其与骨髓瘤细胞融合。
Ⅲ.利用筛选出杂交瘤细胞并进行培养。通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次 ， 获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤。
Ⅳ.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是。单克隆抗体的研发成功解决了普通抗血清的问题。
37. 急性骨髓白血病细胞（AMLC）能快速大量增殖，从而引发急性白血病，有研究表明AMLC自身活性氧族物质（ROS）可以诱导其窃取周围正常的骨髓基质细胞（BMSC）的线粒体，从而满足其高能耗的需求，为证明该结论，请根据以下材料和用具，完成实验设计并回答有关问题：材料与用具：AMLC 悬液、BMSC悬液、细胞培养液、过氧化氢（ROS促进剂）、谷胱甘肽（ROS抑制剂）、血细胞计数板、显微镜、培养瓶等。（说明：具体操作和检测方法不做要求。）
(1)、实验步骤：①取培养瓶若干，随机均分为四组，标号A、B、C、D组（每组有多个重复培养瓶），分别加入适量且等量的细胞培养液和AMLC细胞悬液；
② ， 并测定各组AMLC中线粒体的数量；
③A组不作处理，B组加入适量且等量BMSC细胞悬液，
④在相同且适宜的环境下培养，每隔一定时间重复步骤②；
⑤
(2)、实验结果：（仅以AMLC中线粒体数量为指标，用曲线图形式表示上述实验的结果）(3)、分析与讨论①AMLC 是骨髓中异常增殖和分化的一种细胞，人体消灭它主要依靠免疫。培养液中加入适量的胰岛素有利于AMLC的增殖，原因是
②为了有利于上述实验的进行，可对细胞（填“AMLC”或“BMSC”）的线粒体DNA进行荧光标记。
38. 回答下列（一）（二）小题。(1)、（一）有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
实验使用的培养基，含有营养物质和。制备培养基时，应将pH调至。图中继续实验中可能包含的实验操作有、、。
(2)、通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。你认为可能的原因是。(3)、实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是。按图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL细菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕的细菌数为个/cm2。(4)、（二）回答下列有关基因工程的问题：I．研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内，成功获得了抗虫转基因棉花，在一定程度上减少了杀虫剂的使用，减少了环境污染，提高了作物的产量和质量。
提取某细菌总RNA，经逆转录形成互补的DNA（cDNA），再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA，PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程，故反应体系中需加入酶。(5)、常用农杆菌与经后的外植体共培养一段时间完成转化，需先将C基因的cDNA插入到T质粒的T-DNA上并导入农杆菌，有利于。若要检测目的基因是否反向插入，（填“能”或“不能”）根据带标记的目的基因单链作探针的核酸分子杂交结果判断。(6)、Ⅱ．基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割（如图）。请据图回答：
从CRISPR/Cas9系统作用示意图看，能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是。一般来说，在使用基因编辑工具对不同DNA进行编辑时，应使用Cas9和（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因的相关编辑。
(7)、CCR5基因是人体的正常基因，其编码的细胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵辅助性T淋巴细胞的主要辅助受体之一。科研人员依据的部分序列设计sgRNA序列，导入骨髓造血干细胞中，构建sgRNA-Cas9复合体，以实现对CCR5基因的定向切割，变异的CCR5蛋白无法装配到细胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的从而有效减缓病症。39. 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率高。研究发现药物Y能有效抑制胃癌细胞活力，且与浓度和时间有关。请根据以下实验材料与用具验证上述结论，并回答下列问题。实验材料：人胃癌细胞系、生理盐水、1.5μmol/L药物Y、细胞培养液、培养瓶等。（要求与说明：细胞活力的具体检测方法不作要求。）
(1)、请根据实验结果（如下图所示）完善实验思路。
①；
②；
③分组（用表格形式表示）：；
④放在相同且适宜的条件下培养，。
⑤记录分析实验结果，得出实验结论。
(2)、该实验的结论是。(3)、分析与讨论①癌细胞的数量可在显微镜下用计数。研究发现使用药物Y后，溶酶体活性增强，推测药物Y可能会诱导癌细胞 ， 从而使癌细胞数量减少。
②泛素—蛋白酶体系统（UPS）可以降解细胞内80%以上的蛋白，对细胞的生长、DNA修复发挥重要作用，肿瘤细胞UPS活性异常增高，由此推测，可通过机理研发治疗癌症的药物。
40. 大豆中含有大豆异黄酮，中药姜黄根茎中含有姜黄素。研究人员利用胰腺癌细胞悬液为材料进行了相应的实验探究。备选材料和用具：姜黄素（用2%乙醇配制）、大豆异黄酮（用2%乙醇配制）、2%乙醇、0.9%NaCl溶液、胰腺癌细胞悬液、动物细胞培养液 、卡氏瓶、CO2培养箱、血细胞计数板、显微镜、流式细胞仪等。
(1)、实验目的：(2)、完善实验思路：①取卡氏瓶若干个，均分为4组，编号为A、B、C、D，每组设置多个重复样本；
②向上述各组加入适量且等量的胰腺癌细胞悬液和动物细胞培养液；
③；
④在CO2培养箱中控制适宜条件培养一段时间后，用血细胞计数板测定各组总细胞数，用流式细胞仪测定凋亡的细胞数，计算胰腺癌细胞增殖率和凋亡率；
⑤。
(3)、实验结果：姜黄素和异黄酮都能抑制癌细胞的增殖，二者作用效果差异不大；姜黄素和异黄酮都能促进癌细胞凋亡，且姜黄素效果明显好于异黄酮；姜黄素和异黄酮合用时效果好于单独使用。请设计一个坐标系，并以柱形图的形式表示相应结果。（对照组的增殖率为100%，凋亡率为5%。）(4)、分析和讨论：①姜黄素和异黄酮合用时对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显好于单独使用，最可能的原因是；
②人体内癌细胞的凋亡是免疫的结果。