备考2023年高考生物一轮基础复习专题46 PCR技术
试卷更新日期：2022-06-23 类型：一轮复习
一、单选题
-
1. 数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A、应根据目的基因的一段已知序列设计两种引物 B、PCR每一循环包括变性、复性和延伸三个过程 C、PCR结束后有靶分子的反应单位能检测出荧光 D、每个反应单位中都需要加入解旋酶和耐高温DNA聚合酶2. 如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列。
已知的DNA序列为：
设计的一些PCR引物为：①5′- AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′- GCAATGCGTAGCCTCT-3′③5′- AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′- TCATGAGCGCATAGTT-3′
扩增过程选用的引物是（ ）
A、①和④ B、②和③ C、②和④ D、①和③3. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是（ ）
A、引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则 B、反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关 C、若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平 D、Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链的3'端向5'端延伸4. dsRNA疫苗是一种新冠病毒疫苗，其制备步骤为：扩增新冠病毒靶向干扰基因，构建重组质粒，该载体导入大肠杆菌扩增并鉴定后，将其与腺病毒载体共同转入特定动物细胞，获得重组腺病毒疫苗。该疫苗在人体细胞内合成dsRNA，以干扰新冠病毒基因的表达，下列说法错误的是（ ）A、构建重组质粒需用限制酶和DNA连接酶 B、该疫苗在人体细胞内合成dsRNA的过程需要消耗能量 C、该疫苗能诱导人体的特异性免疫发挥作用 D、可用PCR技术快速扩增靶向干扰基因5. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ）A、增加模板DNA的量 B、延长热变性的时间 C、延长延伸的时间 D、提高复性的温度6. 新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RT-PCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是将逆转录（RT）、PCR以及荧光标记等相结合的技术。下列说法错误的是（ ）A、与抗体检测方法相比，核酸检测能够检测到早期患者和无症状感染者 B、利用上述技术检测新型冠状病毒时，PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNA C、利用上述技术检测新型冠状病毒时，逆转录酶在每次循环中都能够发挥作用 D、RT-PCR反应中需加入样品、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、引物、逆转录酶等7. 我国考古学家利用现代人的 DNA 序列设计并合成了一种类似磁铁的“引子”，成功将极其微量的古人类 DNA 从提取自土壤沉积物中的多种生物的 DNA 中识别并分离出来，用于研究人类起源及进化。下列说法正确的是（ ）A、“引子”的彻底水解产物有两种 B、设计“引子”的 DNA 序列信息只能来自核 DNA C、设计“引子”前不需要知道古人类的 DNA 序列 D、土壤沉积物中的古人类双链 DNA 可直接与“引子”结合从而被识别8. 下列关于现代生物技术的叙述中，不正确的是( )A、试管苗、试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状 B、欲得到多个相同目的基因可采用PCR技术 C、同一植株的体细胞融合后形成的新个体，与原植物可能属于不同物种 D、动物细胞培养过程中CO2的主要作用是维持培养液的pH9. PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（ ）A、都遵循碱基互补配对原则 B、DNA聚合酶作用的最适温度不同 C、都是边解旋边复制的过程 D、复制方式都是半保留复制10. PCR是一种体外扩增DNA的技术，模拟了体内的DNA复制过程。下图是PCR技术原理示意图，下列相关叙述错误的是（ ）
A、物质a是游离的4种脱氧核苷酸 B、过程①中94℃高温的作用相当于解旋酶的作用 C、新合成的子代DNA会恢复双螺旋结构 D、过程①②体现了DNA边解旋边复制的特点11. 丙型肝炎病毒（HCV）为单链RNA复制病毒，其RNA可直接作为信使，通过宿主细胞合成蛋白质，下列叙述错误的是（ ）A、HCV的RNA复制时，需先合成其互补链 B、HCV的RNA复制所需的酶是在宿主细胞中合成的 C、抑制RNA复制所需酶的活性可阻断HCV的增殖 D、PCR技术直接扩增RNA可用于HCV感染的早期诊断12. PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。下列有关该技术的叙述，不正确的是（ ）A、PCR技术的原理是DNA复制 B、变性过程中利用高温使DNA双链解开 C、复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 D、延伸过程需要Taq酶、ATP、四种核糖核苷酸13. 下列关于PCR技术的叙述，错误的是（ ）A、PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 B、根据目的基因全部的核苷酸序列设计引物 C、设计引物时需要避免引物之间碱基互补配对 D、退火温度过高，会破坏引物与模板的碱基互补配对14. PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，正确的是（ ）A、待扩增的DNA两条链的解旋过程需要酶的催化 B、所用引物的长度越短，与模板链结合的特异性越强 C、在子链的形成过程中，dNTP可以提供原料和能量 D、与细胞内DNA复制相比，PCR所需要的酶对高温比较敏感15. PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，下列说法不正确的是（ ）A、PCR需要在一定的缓冲溶液中才能进行 B、PCR所用的解旋酶和DNA聚合酶都具有耐高温的特性 C、PCR 一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步 D、若以某一DNA片段作为模板，5次循环后理论上反应物中应有32个这样的DNA片段16. 下列关于生物技术实践的叙述中正确的是（ ）A、酵母菌的繁殖能力很强，果酒制作时不需对装置进行消毒处理 B、果酒制成后，只需将装置转移到温度较高的环境中即可制作果醋 C、PCR术中，引物I和引物Ⅱ的碱基序列不能互补 D、果酒、果醋、腐乳的制作中有机物的分解都在微生物的细胞内17. PCR反应过程中，引物的作用是（ ）A、打开DNA双链，便于复制进行 B、提供3'端羟基作为DNA合成的起点 C、催化合成DNA子链，以形成新的双螺旋 D、提供5'端羟基作为DNA合成的起点18. 下列有关PCR技术的说法，不正确的是（ ）A、PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术 B、PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA C、PCR技术的原理是DNA双链复制 D、利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列二、综合题
-
19. 新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。(1)、新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是 ， 再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。(2)、为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是。(3)、某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明（答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明。(4)、常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是。20. 金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下，请回答下列问题：
(1)、从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过获得用于PCR扩增。(2)、设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的位点。设计引物时需要避免引物之间形成 ， 而造成引物自连。(3)、图中步骤1代表 ， 步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。(4)、PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定更高的退火温度。(5)、如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物）。